Volume d’échantillon, Dilution des échantillons, Réactifs – Luminex xPONENT 4.0 SP1 Manuel d'utilisation

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Manuel d’utilisation du logiciel Luminex xPONENT 4.0

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Volume d’échantillon

Le volume (ou la taille) des échantillons doit être compris entre 10 et 200 µl. Assurez-vous
qu’une partie de l’échantillon reste dans la cupule après aspiration (environ 25 µl de plus que
le volume d’échantillon) Cette quantité varie selon le type de plaque utilisé. Après acquisition,
l’analyseur Luminex lave les lignes d’échantillons en injectant approximativement 150 µl de
fluide gaine dans la cupule pour une plaque de 96 cupules. Assurez-vous que cette quantité
de fluide peut être ajoutée dans la cupule sans entraîner de débordement et de
contamination d’autres cupules.

Les limites de volume imposées au système d’analyse peuvent être calculées avec la
formule suivante :

Volume total de la cupule (µl) – Volume occupé par l’échantillon (µl) + 150 (µl) < Volume
de cupule maximum (µl)

Volume total de la cupule = Volume d’échantillon de départ d’une cupule avant
que l’appareil procède à l’acquisition. Le volume de la cupule est déterminé par la
consistance de l’ensemble de billes.

Volume occupé par l’échantillon = Volume prélevé pour l’acquisition (doit être
programmé dans le protocole en tant que volume d’échantillon).

150 µl = Volume rejeté, comme indiqué dans le paragraphe précédent.

Volume de cupule maximum = Volume maximum des cupules de la plaque de
microtitration à 96 cupules sélectionnée.

REMARQUE :

Ces informations sur le volume d’échantillon s’appliquent
aux plaques 96 cupules. Pour des renseignements sur
les plaques 384 cupules, consultez les instructions du
kit d’analyse ou contactez l’assistance technique de
Luminex.

Dilution des échantillons

Les échantillons biologiques concentrés, tels que le sérum ou le plasma, doivent être
dilués avec des réactifs à une dilution minimale de 1/5, dans le cadre de la préparation de
l’analyse ou en étape de dilution finale. Si vous utilisez un kit xMAP, suivez les instructions
de dilution fournies avec le kit.

Réactifs

Les réactifs formulés ne doivent contenir aucune autre particule que les billes xMAP.
Les microbilles d’étalonnage ou de vérification xMAP ne doivent pas être diluées.

Émission max (nm)

578

554

Rendement quantique

0,82

0,8

TABLEAU 2. Longueurs d’onde des fluorochromes rapporteurs

R-Phycoerythrin

Alexa 532

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