Leica Biosystems HER2 FISH System - 30 Test - Manuel (Page 8)

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Leica Biosystems Mode d'emploi du Leica HER2 FISH System - 30 Test TA9217 FR-CE-Rev_D 08/04/2013
F. Étapes de la procédure
Ces instructions doivent être lues conjointement avec le mode d'emploi du Leica BOND-
MAX and BOND-III System. Utiliser pour chaque lame un nouveau Leica BOND Universal
Covertile.
L'emploi de Leica BOND Universal Covertiles utilisés auparavant soit pour la coloration
immunohistochimique soit pour l'hybridation in-situ n'a pas été validé avec ce test.
1. Sur le Leica BOND-MAX and BOND-III System, vérifier que les conteneurs pour vrac
et déchets dangereux ont suffisamment de capacité pour réaliser les processus de
coloration requis.
2. Vérifier que les conteneurs de réactifs en vrac contiennent l'alcool adéquat, l'eau distillée
ou déionisée appropriée, la Leica BOND Dewax Solution, la Leica BOND Epitope
Retrieval Solution 1 et la Leica BOND Wash Solution pour l'exécution des cycles de
coloration requis.
3. Vérifier que la Leica BOND Mixing Station installée est propre.
4. Mettre en marche le Leica BOND-MAX and BOND-III System.
5. Mettre en marche le PC connecté au Leica BOND-MAX and BOND-III System.
6. Ouvrir le logiciel Leica BOND.
7. Dans le cas d'un nouveau kit Leica HER2 FISH System - 30 Test, scanner le code-barres
du plateau de réactifs avec le scanner à main pour entrer le système dans l'inventaire de
réactifs Leica BOND (code-barres unique seulement).
8. Préparer Leica BOND Enzyme 5 dans le Leica BOND Open Container fourni à une
dilution de 1/300. Par exemple, pour 10 lames, ajouter 10 µl de Leica BOND Enzyme
Concentrate 2 à 2 990 µl de Leica BOND Enzyme Diluent.
9. Scanner le Leica BOND Open Container fourni et enregistrer comme Bond Enzyme 5.
10. Accéder à l'écran de configuration de la lame, puis cliquer sur Ajouter un cas.
11. Entrer les données du premier cas. Vérifier que le volume de distribution est réglé à
150 µL et que le protocole de préparation est *Dewax. Cliquer sur OK.
12. Une fois le cas mis en évidence sur l'écran de configuration de la lame, cliquer sur
Ajouter lame .
13. Commencer par ajouter les lames test des patients. Vérifier que le type de tissu est réglé
sur Tissu de test.
14. Sélectionner le mode de coloration Simple.
15. Sélectionner le processus ISH.
16. Sélectionner *LSI HER2/CEP17 Dual Probe – 30 Test dans la liste de sondes. L'onglet
Protocoles se positionne par défaut sur le protocole de coloration correct (*FISH Protocol
A ), le protocole HIER (*HIER 25 min with ER1 (97)), le protocole EIER (*Enzyme 5 for 25
min ), la dénaturation (*D10) et l'hybridation (*ISH Hybridization (12Hr)).
17. Répéter les étapes 10 à 16 jusqu'à la création complète des lames test des patients et
des contrôles (lames de contrôle Leica HER2 FISH et/ou contrôles internes). Imprimer
les étiquettes des lames.
18. Étiqueter correctement les lames.
19. Ouvrir les couvercles de tous les conteneurs du Leica HER2 FISH System - 30 Test, puis
charger le plateau de réactifs sur le Leica BOND-MAX and BOND-III System.
20. Appliquer un nouveau Covertile sur chaque lame.
21. Charger le plateau porte-lames sur le Leica BOND-MAX and BOND-III System, puis
appuyer sur le bouton chargement/déchargement.