Leica Biosystems HER2 FISH System - 30 Test - Manuel (Page 15)

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Leica Biosystems Mode d'emploi du Leica HER2 FISH System - 30 Test TA9217 FR-CE-Rev_D 08/04/2013
excessive ou incomplète peut également compromettre la bonne interprétation des résultats.
Une coloration non spécifique résultant d'une sonde non liée a une apparence éparse,
granulaire, qui est visible sur le site d'hybridation prévu ou à une certaine distance. Utiliser des
cellules intactes pour l'interprétation des résultats de coloration. Les cellules nécrotiques ou
dégénérées peuvent se colorer de façon non spécifique (22). Une coloration FISH inattendue
ou des variations de coloration peuvent résulter d'altérations des niveaux d'expression des
gènes de codage. Tout changement des schémas de coloration attendus doit être interprété en
association avec tous les autres examens diagnostiques. L'interprétation de la coloration doit
être complétée par des études morphologiques et l'utilisation de matériau de contrôle approprié,
et doit être évaluée en fonction de l'anamnèse du patient et d'autres tests diagnostiques par un
pathologiste qualifié.
La performance du test (c.-à-d. l'évaluation de l'adéquation des matériaux de contrôle) et
l'interprétation de toute coloration ou de l'absence de coloration doivent être réalisées dans un
laboratoire accrédité/licencié conformément à la législation en vigueur et placé sous le contrôle
d'un pathologiste justifiant des qualifications et de l'expérience nécessaires, ce pathologiste
étant responsable de l'évaluation générale du test d'hybridation in situ et de son interprétation.
Des résultats faussement positifs dans FISH peuvent être dus à une réactivité croisée de la
sonde à d'autres séquences d'acides nucléiques et/ou à une liaison non spécifique. Il faut faire
des contrôles appropriés et les documenter et des tests doivent prendre en compte toutes les
dates de péremption pertinentes.
On peut également constater une variation technique et interprétationnelle quand la technique
FISH est utilisée sur des matériaux dérivés de lignées cellulaires (23).
B. Restrictions spécifiques au produit
Ce produit n'est pas destiné à être utilisé pour un autre test diagnostique quelconque basé sur
l'ADN.
Ne pas remplacer les réactifs du Leica HER2 FISH System - 30 Test par d'autres composants
fournis par Leica Biosystems ou d'autres fabricants. Cela aurait pour effet d'invalider le test.
L'utilisateur doit valider tout écart par rapport aux procédures recommandées.
Il est recommandé d'utiliser pour l'essai des tissus fixés uniquement dans des fixateurs à base
de formol. L'utilisation de tout autre type de fixateur peut invalider le test.
Les coupes tissulaires dépassant la plage d'épaisseur recommandée n'ont pas été validées.
Toute autre épaisseur de coupe peut invalider le test.
Concordance clinique du Leica HER2 FISH System - 30 Test avec
Abbott Molecular PathVysion HER-2 DNA Probe Kit
Cette étude a examiné l'aptitude du Leica HER2 FISH System - 30 Test en tant que dispositif
d'aide à la détermination du traitement Herceptin (trastuzumab). L'étude a été conçue pour
examiner la concordance entre le Leica HER2 FISH System - 30 Test et un dispositif de
diagnostic approuvé antérieurement, Abbott Molecular PathVysion HER-2 DNA Probe Kit,
considéré comme l'« étalon-or » pour ce test. Le critère d'acceptation pour le contrôle était que
la limite inférieure de l'intervalle de confiance unilatéral à 95% soit supérieure à 90% entre le
Leica HER2 FISH System - 30 Test et le Abbott Molecular PathVysion HER-2 DNA Probe Kit
manuel, entre des cas de cancer du sein invasif positifs (amplifiés) et négatifs (non amplifiés),
fixés au formol, enrobés de paraffine (FFPE).
L'étude réalisée était une évaluation à l'insu, effectuée sur trois sites, d'échantillons de cancer du
sein invasif constaté cliniquement. Chacun des sites d'investigation a reçu des blocs archivés,
fixés au formol, enrobés de paraffine, de tissu porteur d'un cancer du sein invasif dont les
niveaux d'expression de l'oncoprotéine HER2 étaient connus. Une cohorte de 300 échantillons
consistant en 75 cas IHC précédemment caractérisés 0/1+ ; 150 cas IHC précédemment
caractérisés 2+ ; et 75 cas IHC précédemment caractérisés 3+, a été sélectionnée et répartie
équitablement entre les trois sites d'investigation de l'essai.