Leica Biosystems HER2 FISH System - 30 Test - Manuel (Page 22)

Page 22 de 25
Français
Leica Biosystems Mode d'emploi du Leica HER2 FISH System - 30 Test TA9217 FR-CE-Rev_D 08/04/2013
Dépannage
Problème Cause probable Correction
Signal
fluorescent/
coloration
absent(e) ou
faible
Fixation ou traitement
inappropriés d'échantillons
ayant valeur de test
Vérifier qu'un fixateur à base de formol est
utilisé et que les programmes de traitement
conviennent à l'échantillon qui passe le test.
Le Leica HER2 FISH System
- 30 Test est utilisé alors que
la date de péremption est
dépassée.
Vérifier que la date de péremption
spécifiée pour le Leica HER2 FISH System -
30 Test n'est pas dépassée.
Sélection du protocole
incorrect
Vérifier que la valeur par défaut du *FISH
Protocol A est appropriée dans le champ
du protocole de coloration de la boîte de
dialogue Ajouter lame.
Distribution de réactifs en vrac
inappropriée
Vérifier que tous les réactifs Leica BOND
ont été attribués aux conteneurs de vrac
appropriés et qu'ils ont été correctement
positionnés sur l'instrument.
Déparaffinisation inadéquate
des lames
Vérifier que le mode *Dewax est sélectionné
dans le champ Préparation de la boîte de
dialogue Ajouter lame.
Prétraitement inapproprié Vérifier que les protocoles de prétraitement
par défaut (HIER et digestion enzymatique)
sont sélectionnés.
Adapter le protocole de prétraitement (HIER
ou digestion enzymatique) si nécessaire.
Dénaturation inadéquate Vérifier que la dénaturation par défaut
appropriée *D10 est sélectionnée.
Hybridation inadéquate Vérifier que l'hybridation par défaut
appropriée *H12 est sélectionnée.
Prolonger le temps d’hybridation si
nécessaire.
Lavage post-hybridation
excessif Diminuer le temps d’incubation du lavage
post-hybridation
Processus interrompu avant
la fin
À l'aide du logiciel Leica BOND, confirmer la
présence d'une erreur rapportable pendant
le processus de coloration et la résoudre en
suivant les instructions du logiciel Leica BOND.
Équipement de microscopie à
fluorescence inapproprié
•
Jeu de filtres inapproprié
• Lampe incorrecte
• Lampe périmée
• Type d'huile incorrect
S'assurer que l'équipement de microscopie
à fluorescence utilisé est dans son
intégralité approprié pour le test réalisé,
confirmer :
•
Jeu de filtres approprié
• Lampe appropriée
• Puissance de la lampe correcte
• Huile appropriée utilisée pour la
microscopie à immersion dans l'huile
Surexposition à la lumière UV
(photoblanchiment)
Stocker les lames dans l'obscurité, avant
et après l'évaluation, afin de préserver
les signaux fluorescents. Pour préserver
le signal lors d'un stockage à long terme,
stocker les lames à –20 ºC.