Leica Biosystems HER2 FISH System - 30 Test - Manuel (Page 6)

Page 6 de 25
Français
Leica Biosystems Mode d'emploi du Leica HER2 FISH System - 30 Test TA9217 FR-CE-Rev_D 08/04/2013
Les coupes tissulaires montées sur les lames chargées (Leica BOND Plus Slides S21.2113)
peuvent être gardées jusqu'à 12 mois entre 2 et 8 °C avant la coloration. Après la coupe, il est
recommandé de laisser les lames incuber à 60 °C pendant une heure. Les coupes colorées
doivent être stockées à -20 °C pour préserver le signal fluorescent et empêcher une décoloration.
Attendre que les lames stockées soient à température ambiante avant de les observer.
Avertissements et précautions
Uniquement pour les utilisateurs professionnels.
Le produit renferme un ou plusieurs produits dangereux qui peuvent être préjudiciables au fœtus.
Les personnes âgées de moins de 18 ans ne sont pas autorisées à travailler avec ce produit.
Les utilisateurs doivent avoir reçu des instructions précises concernant la procédure correcte,
les caractéristiques dangereuses du produit et les prescriptions de sécurité nécessaires.
Les échantillons, avant et après la fixation, ainsi que tous les matériaux exposés à ces
échantillons, doivent être traités comme s'ils étaient susceptibles de transmettre une infection
et éliminés avec les précautions qui s'imposent.
Ne jamais pipetter les réactifs à la bouche et veiller à éviter tout contact des réactifs et des
échantillons avec la peau et les membranes muqueuses. Si les réactifs ou les échantillons
entrent en contact avec des zones sensibles, rincer abondamment à l'eau. Demander conseil
à un médecin. Il convient de se renseigner sur les réglementations locales ou nationales en
vigueur pour l'élimination de tout composant potentiellement toxique.
Minimiser la contamination microbienne des réactifs afin d'éviter une augmentation de
coloration non spécifique.
Procédure
A. Réactifs requis mais non fournis
• Leica BOND Dewax Solution (AR9222)
• Leica BOND Epitope Retrieval Solution 1 (AR9961)
• Leica BOND Wash Solution x10 Concentrate (AR9590)
• Solvants standard utilisés lors des tests basés sur l'hybridation fluorescente in situ
(p. ex. éthanol, absolu et au degré déterminé)
• Eau distillée ou eau déionisée
• Contre-coloration au DAPI
• Leica HER2 FISH Control Slides (TA9123)
• Leica BOND Aspirating Probe Cleaning System (CS9100)
B. Équipement requis mais non fourni
• Pipettes (permettant de mesurer des volumes de 1 à 20 µl, de 100 et 1000 µl)
• Lames chargées (Leica BOND Plus Slides – S21.2113)
• Leica BOND-MAX (21.0051) or Leica BOND-III (21.2201)
• Leica BOND Universal Covertiles
™ (S21.2001)
• Leica BOND Mixing Stations (S21.1971)
• Leica BOND Slide Label & Print Ribbon (S21.4564)
• Lamelles couvre-objet
• Étuve à air chaud (capable de maintenir une température de 60 °C)
• Microscope à fluorescence (objectif de 60–100x) avec source lumineuse appropriée.
Noter le nombre d'heures d'utilisation de l'ampoule et remplacer l'ampoule avant la durée
de vie prévue. Veiller au bon alignement de la lampe.
• Jeu de filtres de fluorescence approprié (SpectrumOrange ™ – pic d'excitation à 559 nm,
pic d'émission à 588 nm, SpectrumGreen ™ – pic d'excitation à 497 nm, pic d'émission
à 524 nm et DAPI – pic d'excitation à 367 nm, pic d'émission à 452 nm). Des jeux de