Hoefer SE400 - Manuel (Page 43)

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Remarque: Comme il s’agit
d’une méthode de coloration
très sensible, il est important
de porter des gants lors de
la manipulation des gels et
d’utiliser des récipients propres.
Afin de réduire l’arrière-plan,
utilisez uniquement des réactifs
de haute pureté et de supprimer
tous les tampons des gels lors
de la fixation et les étapes
détachantes.
Coomassie Protocole Stain
A. gel taches dans coomassie solution de coloration
à la température ambiante pendant une nuit. Les
gels peuvent également être colorés rapidement en
les plaçant à 55 °C dans un bain-marie à agitation
pendant 30-45 min.
B. Placer un gel dans une solution Destain I à la
température ambiante. Changer la solution Destain
quand il atteint une couleur bleu foncé sur fond
clair avant que les résultats.
C. Conserver le gel dans la solution II Destain.
Pour une méthode plus sensible, de l’argent protocole
tache est recommandé.
Argent Protocole Stain
(Adapté de Morrissey, 1981)
Agitation douce est recommandé tout au long de cette
procédure.
A. Colorer le gel comme d’habitude avec du bleu de
Coomassie. Décolorer le gel avec plusieurs change-
ments de la solution II Destain.
-Ou-
Fixer le gel dans 100 ml Destain solution que
j’ai pendant 30 minutes, puis placez le gel dans
100-200 ml Destain II solution pendant 30 minutes.
Jeter la solution, de remplissage, et laver avec une
solution Destain II a 30 minutes suivantes.
B. Transférer le gel à 100 ml solution de réticulation
pendant 30 minutes.
C. Décanter le glutaraldéhyde et rincer le gel avec
plusieurs changements de l’eau déminéralisée sur
une période de deux heures.
-Ou-