Hoefer SE400 - Manuel (Page 28)

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2.5 Résoudre l’échantillon
Paramètres d’électrophorèse pour gels de
polyacrylamide discontinus
Les gels peuvent être exécuté à chaque constants
courants ou constants réglages de tension.
Un réglage de courant constant est tradition-
nellement utilisé avec un système tampon
discontinu de sorte que le taux de migration
électrophorétique reste inchangé pendant toute
la course. Sous constants conditions actuelles,
la tension augmente comme le produit terme.
Une valeur inférieure actuelle est recommandé
pour une meilleure résolution. Le niveau opti-
mal de courant doit être déterminé de manière
empirique, les principaux facteurs qui doivent
être équilibrés sont la concentration du gel et de
la vitesse de migration, et le chauffage par effet
Joule et la distorsion résultant de bande. Tableau
3 listes de départ des lignes directrices de point
et les ajustements pour l’épaisseur du gel, le
nombre de gels, et taux de migration.
Tableau 3. Système de tampon Laemmli à partir des
lignes directrices de points
Épaisseur du gel* 1,5 mm
Courant par gel
† 25 mA à courant constant
À partir de tension 80–90 V
La longueur
du gel (cm) modèle tension finale (V)
16 SE400 200–250
24 SE410 275–325
* Gels plus ou moins épais nécessitent proportionnellement
plus ou moins de courant. Par exemple, un gel de 0,75 mm,
qui est la moitié de l’épaisseur d’un gel de 1,5 mm, exige
que la moitié autant de courant, ou 12,5 mA.
† Le courant doit être multiplié par le nombre de gels. Par
exemple, si un 1 mm 2-gel sandwich est installé, le courant
deux fois plus importante est requise que pour un seul gel de
1 mm à la même tension.
Remarque: La section (et
l’exigence actuelle) est
déterminée par l’épaisseur du
gel. Le temps d’exécution est
déterminée par la longueur
de la plaque.