Hoefer SE400 - Manuel (Page 22)

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Verser la “lumière” solution dans la chambre du réser-
voir (la chambre la plus éloignée de l’entrée). Ouvrir
le robinet assez longtemps pour chasser l’air entre les
chambres et puis sur Fermer. Verser le “lourd” solu-
tion dans la chambre de mélange et placer une barre
d’agitation dans cette chambre. Placez la machine à
gradient sur un agitateur magnétique et commencer
agitation à une vitesse telle qu’elle n’introduit pas de
bulles dans la solution.
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Mélanger le gradient. Alors que la solution est en
remuant, commencer à pomper (5-10 ml / min) à
partir de la chambre de mélange et immédiatement
ouvrir le robinet à la chambre du réservoir. Augmenter
la canule que le liquide pénètre dans le sandwich, en
gardant la pointe à la surface du gel.
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Superposer chaque gel avec une mince couche d’eau
saturée du n-butanol, de l’eau, ou un tampon de gel
dilué pour empêcher l’exposition du gel à l’oxygène.
Lentement offrir la solution de superposition d’une
seringue en verre munie d’une aiguille de calibre 22.
Appliquer la solution à proximité de l’entretoise et lui
permettre de s’écouler à travers la surface nu.
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Permettre au gel (s) à polymériser pour un minimum
d’une heure. Après polymérisation, verser la superpo-
sition et rincer la surface du gel à plusieurs reprises
avec de l’eau distillée.
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Préparer la solution de gel d’empilement monomère,
versez le gel d’empilement et d’introduire un peigne
(avec un léger angle) dans le sandwich, en prenant soin
de ne pas emprisonner de l’air sous les dents. Prévoir
un minimum d’une heure pour le gel à polymériser.