Hoefer SE400 - Manuel (Page 41)

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8. Tampon d’électrophorèse
(0,025 M Tris, 0,192 M glycine, 0,1% SDS, pH 8,3,
5,0 liters)
Tris (FW 121,1) 0,025 M 15,1 g
Glycérol (FW 75,07) 0,192 M 72,1 g
SDS (FW 288,4) 3,5 mm 5,0 g
Désionisée H
2
O à 5,0 liters
Le pH de ce tampon est d’environ 8,3. Ne pas ajuster le pH.
Jusqu’à 20 litres peuvent être préparés et conservés jusqu’à
2 mois.
9. Coomassie solution de coloration
(0,025% Bleu de Coomassie R-250, 40% Le métha-
nol, 7% Acetic acid, 2 liters)
Bleu de Coomassie R-250 (FW 826) 0,3 mm 0,5 g
Methanol (Stir until dissolved) 40% v/v 800,0 ml
L’acide acétique 7% v/v 140,0 ml
Désionisée H
2
O à 2,0 liters
10. Destain solution I
(40% Le méthanol, 7% L’acide acétique, 1 liter)
Le méthanol 40% v/v 400,0 ml
Acetic acid 7% v/v 70,0 ml
Désionisée H
2
O à 1,0 liter
11. Destain solution II
(7% L’acide acétique, 5% Le méthanol)
Le méthanol 5% v/v 50,0 ml
L’acide acétique 7% v/v 70,0 ml
Désionisée H
2
O à 1,0 liter
12. Réticulation solution
(10% glutaraldéhyde)
20 ml de stock glutaraldéhyde à 50%
L’eau distillée à 100 ml
13. DTT (dithiothréitol) solution
(5 µg/ml)
5 mg DTT
Porter à 1 L avec ddH
2
O.
Attention! Glutaraldéhyde ne
doivent être manipulés sous
une hotte.