Hoefer SE640 - Manuel (Page 44)

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Pour les gels de gradient linéaire, utilisez des
volumes égaux de faible et de haute% des
solutions% d’acrylamide dans les 2 chambres
du fabricant gradient. APS moins est ajouté à
prolonger le temps de polymérisation, et moins
encore est ajouté à la solution T supérieur%
pour permettre la polymérisation de se produire
à partir du haut vers le bas. Dans notre expéri-
ence avec les concentrations dans l’exemple ci-
dessous gradient 10-20%, gels peut être versé à
un débit de 5-10 ml/min.
Sur gel à gradient linéaire
(pour 100 ml de solution)
10% T 20% T
Acrylamide stock (Solution #1) 33,30 ml 66,70 ml
Saccharose — 15,00 g
1,5 M TrisCl, pH 8,8 (Soln, #2) 25,00 ml 25,00 ml
10% SDS (Solution #4) 1,00 ml 1,00 ml
Désionisée H
2
O à 100,00 ml à 100,00 ml
10% APS (Solution #5) 0,300 ml 0,060 ml
TEMED 0,036 ml 0,036 ml