Hoefer SE640 - Manuel (Page 28)

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Séparation de l’échantillon
Paramètres d’électrophorèse pour gels de
polyacrylamide discontinus
Les gels peuvent être exécuté à chaque constants
courants ou constants réglages de tension. Un
réglage de courant constant est traditionnelle-
ment utilisé avec un système tampon discontinu
de sorte que le taux de migration électrophoré-
tique reste inchangé pendant toute la course.
Dans ces conditions, la tension augmente comme
le produit terme. Une valeur inférieure actuelle
est recommandé pour une meilleure résolution.
Le niveau optimal de courant doit être déterminé
de manière empirique, les principaux facteurs
qui doivent être équilibrés comprennent la con-
centration du gel et de la vitesse de migration, et
le chauffage par effet Joule et la distorsion résul-
tant de bande. Tableau 2 listes de départ des
lignes directrices de point et les ajustements pour
l’épaisseur du gel, le nombre de gels, et taux de
migration.
Courant
Courant agit sur l’ensemble de la section transversale
de tous les gels, parce que les gels sont connectés en
parallèle dans le circuit électrique. Ainsi, le réglage
actuel pour un gel doit être multiplié par le nombre
de gels de l’épaisseur même gel que sont exécutés
simultanément. Pour un gel 1,5 mm d’épaisseur, nous
vous proposons une mise de départ de courant de
25 mA. (Deux de 1,5 mm gels = 50 mA.)
Tension
La tension de démarrage pour un gel de 1,5 mm dalle
connectée à une alimentation de puissance réglé à
25 mA est généralement de 80 à 90 V (en utilisant
la SE600 avec un système tampon de Laemmli
discontinue pour gels SDS). La tension finale peut
généralement varier de 220 à 400 V, en fonction de
la longueur du gel. (Voir le tableau 2.)
Remarque: Tous les
modèles de la série SE600
utilisent 18 cm larges
plaques. L’épaisseur du
gel détermine la section
transversale (et l’exigence
actuelle). La longueur de la
plaque détermine le temps
d’exécution.
Table 2: Laemmli buffer system
starting point guidelines
Épaisseur du gel* 1,5 mm
Courant par gel † 25 mA
à courant
constant
À partir de tension ‡ 80 – 90 V
Tension finale 220 – 250 V
* Les gels plus ou moins épais nécessitent propor-
tionnellement plus ou moins de courant. Par
exemple, un gel de 0,75 mm, qui est la moitié
de l’épaisseur d’un gel de 1,5 mm, exige que la
moitié autant de courant, ou 12,5 mA.
† Le courant doit être multiplié par le nombre de
gels. Par exemple, si deux clubs sandwichs sont
installés, les quatre gels besoin de quatre fois
plus de courant. Le courant peut être augmenté
pour accélérer le parcours si le refroidissement
actif est utilisé et il peut être diminué pour plus
lentes pistes la nuit.
‡ A 25 mA par gel.