Hoefer SE640 - Manuel (Page 41)

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6. 0,375 M TrisCl, 0,1% SDS, pH 8.8
(Gel de résolution de superposition, 100 ml)
1,5 M de Tris-Cl, pH 8,8 (Soln. 2) 0,375 M 25,0 ml
10% (Soln. 4) de SDS
3,5 mM 1,0 ml
Déminéralisée H
2
O à 100,0 ml
-Ou-
De l’eau saturée en n-butanol
Agiter le n-butanol et désionisée H
2
O dans une ampoule à
décanter. Retirez le aqueuse (inférieure) de phase. Répétez
cette procédure plusieurs fois. Utilisez la phase supérieure.
-Ou-
Si un recouvrement interfère avec le protocole préféré, isoler
le gel de l’oxygène atmosphérique en plaçant un peigne vide
ou gel de résolution sur le gel ex.
7. 2X tampon traitement de l’échantillon
(0,125 M TrisCl, 4% SDS, 20% de glycérol,
2% de 2-mercaptoéthanol, pH 6,8, 10 ml)
0,5 M de Tris-Cl, pH 6,8 (Soln. 3) 0,125 M 2,5 ml
SDS à 10%, 0,35 M (Soln. 4)
0,14 M 4,0 ml
Glycérol (FW 92.09) 20% v/v 2,0 ml
Le 2-mercaptoéthanol (FW 78,13) 2% v/v 0,2 ml
[-OU-dithiothréitol (DTT) 0,2 mM 0,31 g]
(FW 154,2)
Le bleu de bromophénol (FW 691,9) 0,03 mM 0,2 mg
Déminéralisée H
2
O à 10,0 ml
Diviser en parties aliquotes 1,0 ml et conserver à -40 °C à
-80 °C.
-Ou-
6X tampon traitement de l’échantillon
(0,35 M TrisCl, 10% de SDS, le glycérol 30%,
DTT 9,3%, pH 6,8, ~10 ml)
0,5 M de Tris-Cl, pH 6,8 (Soln. 3) 0,35 M
7,0 ml
SDS (FW 288,4) 0,35 M 1,0 g
Glycérol (FW 92.09) 30% v/v 3,0 ml
TNT (FW 154.2) 0,6 M 0,93 g
Bleu de bromophénol (FW 691,9) 0,175 mM 1,2 mg
Diviser en parties aliquotes 1,0 ml et conserver à -70 °C.