Hoefer SE640 - Manuel (Page 37)

•
p29
Résolution bande
pauvre Conditions de fonc-
tionnement Commencer l’électrophorèse dès que l’échantillon est chargé
d’empêcher espèces de faible poids moléculaire à partir de
diffusion.
Effectuer la séparation en basse tension ou de courant pour
réduire le chauffage par effet Joule.
Qualité réactif Utilisez uniquement les réactifs la plus haute qualité.
Pauvre empilage Utilisez des gels seulement qui ont été récemment préparés.
Ajouter un gel d'empilement ou augmenter la taille du gel
d'empilement. Préparer la surface résolvant-gel en commen-
çant par le rinçant avec empilage-gel monomère avant de
verser le gel d'empilement pour assurer la continuité entre
les gels.
Vérifier les valeurs de pH des résolution-et-gel d'empilement
des solutions. Ne reculez pas-titrage tampons.
Polymérisation en
gel incomplète Permettre à un gel pour polymériser complètement.
La préparation des
échantillons Conserver l'échantillon sur la glace avant qu'il ne soit
dénaturé.
Dialyser ou dessaler l'échantillon.
Échantillons de chaleur dans le tampon d'échantillon SDS
pour pas plus de 1–2 min à 100 °C pour améliorer la dis-
sociation des sous-unités. Conservez-le sur la glace après le
chauffage.
Ajustez le volume d'échantillon ou de la concentration.
Ajouter plus de mercaptoéthanol ou le dithiothréitol; vérifier
traitement de l'échantillon.
Ajouter inhibiteurs de la protéase tels que PMSF si
nécessaire pour prévenir la dégradation protéolytique de
l'échantillon.
Augmenter le glycérol ou le saccharose pour augmenter la
densité de l'échantillon.
Conserver les échantillons à congeler en portions aliquotes
pour éviter répétée congélation-décongélation. Conserver à
-40 à -80 °C.
problème cause possible remède