Hoefer SE640 - Manuel (Page 21)

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Des gels de gradient
Les deux gels à gradient linéaire et exponentielle
peut être versé dans la coulée de gel double. Nous
recommandons d’utiliser un Maker Hoefer SG
Dégradé Série. Des gels de gradient sont versés
avec une canule à partir du haut de la roulette de
gel double (voir figure 5). Un gel d’empilement est
ensuite versé sur le gel de gradient.
Verser un gel gradient linéaire
1
Assembler en sandwich(es) dans le lanceur de sorts
de gel double tel que décrit à la page 8.
2
Mettre en place le chemin d’écoulement monomère solution
Exécuter une longueur de tube à travers Tygon
™
une pompe péristaltique. Attacher une extrémité
de la tubulure à l’orifice de sortie de gradient
machine et l’autre extrémité à une canule 9 cm. (La
DO de la canule doit être inférieure à l’épaisseur
d’espacement.) Placer la canule de sorte qu’il
repose au fond du sandwich, à mi-chemin entre les
entretoises.
3
Préparer la solution de monomère
Calculez le volume de solution de monomère
nécessaire. Divisez le volume total de moitié et de
préparer ce volume à la fois des solutions de haut et
de bas-pourcentage d’acrylamide.
Fig 5. Verser un gel de gradient.
La solution de gel peut être
introduit dans le sandwich sur gel
dans une pointe de pipette à un
taux qui maintient un flux continu.
En option: Ajuster la solution
d’acrylamide plus élevés en
pourcentage à 15% (p/v) de
saccharose ou de 25% (v/v)
de glycérol pour améliorer la
superposition.