Hoefer SE640 - Manuel (Page 20)

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Superposer chaque gel avec une mince couche d’eau
saturée du n-butanol, de l’eau, ou un tampon de gel
dilué pour empêcher l’exposition du gel à l’oxygène.
Lentement offrir la solution de superposition d’une
seringue en verre munie d’une aiguille de calibre 22.
Appliquer la solution à proximité de l’entretoise sur
le côté du sandwich et lui permettre de s’écouler à
travers la surface nu.
3
Permettre au gel pour polymériser pour un minimum
d’une heure.
Préparation de gel d’empilement
Verser le gel d’empilement tout le sandwich est
encore dans la machine de coulée du gel. Empile-
ment de résolution gel est optimale quand on le
verse juste avant l’électrophorèse.
1
Retirez le cache en rinçant le haut du gel à plusieurs
reprises avec de l’eau distillée. Inversez le lanceur de
sorts à égoutter. Pour assurer un contact continu entre
la résolution et l’empilement des gels, enlever tout
liquide résiduel en tamponnant un coin avec un tissu
non pelucheux.
2
Préparer la quantité requise de solution de monomère
d’empilage de gel, il désaérer, et ajouter de catalyseur
(APS) et de l’initiateur (TEMED). Verser le gel
d’empilement sur le gel de résolution avec une pipette
Pasteur jetable ou à un niveau d’environ 2 mm à
partir de la partie supérieure de la plaque.
3
Mettre en place un peigne (avec un léger angle) dans
le sandwich, en prenant soin de ne pas emprisonner
de l’air sous les dents. Prévoir un minimum d’une
heure pour le gel à polymériser.