Hoefer HE99X - Manuel (Page 18)

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Notes, des tampons,
|et des volumes
Exécution des tampons pour l’ADN dans des
gels d’agarose
Recettes pour les trois les plus couramment utili-
sés en cours d’exécution pour les tampons d’élec-
trophorèse d’ADN sont énumérés ci-dessous.
La capacité tampon de TBE à la fois et TPE est
généralement suffisante pour que la circulation du
tampon n’est pas nécessaire. La circulation peut
être nécessaire au cours de longueur supérieure à
3 heures ou si vous utilisez le tampon TAE.
1. 10X Tris-borate-EDTA stock tampon (TBE) a
(0,89 M Tris, 0,89 M d’acide borique, 20 mM EDTA,
pH ~8,2, 1000 ml)
Tris base (FW 121,1)
0,89 M 108,0 g
L’acide borique (FW 61,8) 0,89 M 55,0 g
EDTA solution
(0,5 M, pH 8,0, sol. 4)
0,02 M 40,0 ml
Déminéralisée H
2
O à 1000,0 ml
Incorporer. Ne pas ajuster le pH. Avant d’utiliser soit
pour diluer: 0.5X, pour donner 45 mM Tris base,
45 mM d’acide borique, et 1 mM d’EDTA. Cette
dilution est souvent utilisé car le courant reste faible,
donc moins de chaleur.
-Ou-
1X, pour donner 89 mM de Tris base, 89 mM d’acide
borique, et 2 mM d’EDTA.
Important! Ne pas ajuster le pH
de ces tampons une fois qu’ils
sont préparés selon la recette!