Hoefer HE99X - Manuel (Page 11)

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Mode d'emploi
Gels d'agarose sont d'abord jeté dans le kit de
coulage de gel, et les échantillons sont ensuite
chargés dans les puits et séparés par électropho-
rèse. Le bromure de colorant fluorescent éthidium
peut être ajouté à la mémoire tampon de gel
ou électrophorèse ou les deux afin de suivre les
progrès de séparation. À la fin de l'électrophorèse,
le gel peut être teinté et photographié, épongez
transférés, ou séchée pour autoradiographie.
Couler le gel
Préparer les solutions
1
Préparer environ 1,3 litres de tampon. À 100 ml de
tampon est nécessaire pour le gel et 1,2 litres pour la
chambre tampon. Reportez-vous à la page 10 pour les
recettes de trois tampons couramment utilisés électro-
phorétiques en cours d'exécution.
2
Préparer le tampon de chargement de l'échantillon.
Reportez-vous à la page 12 pour une recette et la
capacité de volume sous forme de tableaux pour
chaque taille de peigne.
3
Préparer une solution d'agarose(s).
Dissoudre l'agarose dans la gestion de mémoire
tampon, la chaleur selon les instructions accompa-
gnant l'agarose, et laissez la solution refroidir à 50 °C
avant de verser dans le bac en cours d'exécution.
Facultatif: Ajouter 0,5 µg/ml de bromure d'éthidium
à la solution de gel, afin de faciliter l'observation des
progrès de séparation pendant l'électrophorèse.
Avant de commencer:
1. Laver tous les composants
avec une solution diluée de
détergent de laboratoire et
bien rincer.
2. Niveau de l'unité en plaçant
le niveau à bulle sur la plate-
forme en cours d'exécution
et en ajustant les pieds de
nivellement.
Volume 3 mm d'épaisseur gels
taille du
bac (cm)
agarose (ml)
15 × 10 45
15 × 15 68
15 × 20 90
Attention! Le bromure
d'éthidium est un mutagène
connu. Toujours porter des gants
lors de la manipulation.