Hoefer SE600 - Manuel (Page 31)

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Remarque: Toutes les unités de
la série SE600 utilise 18 cm de
large plaques. L’épaisseur du gel
détermine la section transversale
(et l’exigence actuelle) pour
constants pistes actuelles. La
longueur de la plaque détermine
le temps d’exécution.
Séparation de l’échantillon
Paramètres d’électrophorèse pour des gels de
polyacrylamide discontinus
Les gels peuvent être exécuté à chaque constants
courants ou constants réglages de tension. Un
mode courant constant est traditionnellement
utilisé avec un système tampon discontinu de
sorte que le taux de migration électrophorétique
reste inchangé pendant toute la course. Dans ces
conditions de tension augmente à mesure que le
produit terme. Une valeur inférieure actuelle est
recommandé pour une meilleure résolution. Le
niveau optimal de courant doit être déterminé
de manière empirique, les principaux facteurs
qui doivent être équilibrés comprennent
la concentration du gel et de la vitesse de
migration, et le chauffage par effet Joule et la
distorsion résultant de bande. Tableau 2 énumère
les lignes directrices à partir de point et les
ajustements pour l’épaisseur du gel, le nombre
de gels, et taux de migration.
Courant
Courant agit sur l’ensemble de la section transversale
de tous les gels, parce que les gels sont connectés en
parallèle dans le circuit électrique. Ainsi le réglage
actuel pour un gel de doit être multiplié par le nombre
de gels de la même section transversale d’exécution
simultanément. Pour un gel 1,5 mm d’épaisseur, nous
vous proposons une mise de départ de courant de
25 mA. (Deux de 1,5 mm gels = 50 mA.)
Remarque: Le refroidissement peut être nécessaire
pour contrôler le chauffage par effet Joule.
Tension
La tension de démarrage pour un gel de 1,5 mm dalle
connectée à une alimentation de puissance réglé à
25 mA est généralement de 80 à 90 V (en utilisant
la SE600 avec un système de tampon de Laemmli
discontinue pour gels SDS). La tension finale est
typiquement 250 à 400 V, en fonction de la longueur
du gel. (Voir le tableau 3.)
Table 3: Laemmli buffer system
starting point guidelines
Épaisseur du gel* 1,5 mm
Courant par gel † 25 mA
à courant
constant
À partir de tension ‡ 80 – 90 V
Tension finale 220 – 250 V
* Les gels plus ou moins épais nécessitent
proportionnellement plus ou moins de
courant. Par exemple, un gel de 0,75 mm,
qui est la moitié de l’épaisseur d’un gel
de 1,5 mm, exige que la moitié autant de
courant, ou 12,5 mA.
† Le courant doit être multiplié par le
nombre de gels. Par exemple, si deux clubs
sandwichs sont installés, les quatre gels
besoin de quatre fois plus de courant. Le
courant peut être augmenté pour accélérer
le parcours si le refroidissement actif est
utilisé et il peut être diminué pour plus
lentes pistes la nuit.
‡ A 25 mA par gel.