Hoefer SE600 - Manuel (Page 23)

•
p15
3
Préparer la solution de monomère
Calculez le volume de solution de monomère
nécessaire. Divisez le volume total de moitié et de
préparer ce volume à la fois des solutions de haut et
de bas-pourcentage d’acrylamide.
4
Verser la “lumière” solution dans la chambre du
réservoir (la chambre la plus éloignée de la sortie).
Ouvrir le robinet entre les chambres assez longtemps
pour déplacer l’air, puis fermez. Verser le “lourd”
solution dans la chambre de mélange et placer une
barre d’agitation dans cette chambre. Placer la
machine sur gradient d’un agitateur magnétique et de
commencer une agitation à un taux qui se mélangent
bien, mais n’introduit pas de bulles dans la solution.
5
Mélanger le gradient et pomper la solution dans le
sandwich
Tandis que la solution est sous agitation, commencer
le pompage de la chambre de mélange et ouvrir
le robinet à la chambre de réservoir. Augmenter la
canule que le liquide pénètre dans le sandwich, en
gardant la pointe à la surface du gel. Préparer des
gels plus que nécessaire.
6
Superposer chaque gel avec une mince couche d’eau-
butanol saturé d’eau, ou un tampon de gel dilué pour
empêcher l’exposition du gel à l’oxygène. Lentement
offrir la solution de superposition d’une seringue en
verre munie d’une aiguille de calibre 22. Appliquer
la solution à proximité de l’entretoise sur un côté du
sandwich et lui permettre de s’écouler à travers la
surface nu.
7
Autoriser les gels à polymériser pour un minimum de
1 h. Après polymérisation, verser la superposition et
rincer la surface du gel à plusieurs reprises avec de
l’eau distillée.
En option: Ajuster la solution
d’acrylamide plus élevés en
pourcentage à 15% (p / v) de
saccharose ou de 25% (v / v)
de glycérol pour améliorer la
superposition.