Eppendorf BioSpectrometer fluorescence - Manuel (Page 35)

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Méthodes
Eppendorf BioSpectrometer ® fluorescence
Français (FR)
6.2.3 Groupe de méthodes Basic
Factor, standard
• Mesure effectuée à une longueur d'onde et évaluation avec facteur ou standard.
• Les méthodes d'évaluation avec facteur ou standard sont pré-programmées.
Calibration curve
• Mesure effectuée à une longueur d'onde suivie de l'évaluation avec une série de 2 à 12 standards.
• Différents procédés d'évaluation ("Curve fit") comme régression linéaire, régression non linéaire sont
proposés.
• Affichage des résultats standards sous forme de graphique ou de tableau.
• Possibilité d'utilisation de la dernière évaluation standard enregistrée.
• Une méthode est pré-programmée pour l'évaluation avec courbe standard.
6.2.4 Groupe de méthodes Advanced
Dual wavelength
• Mesure effectuée à deux longueurs d'onde et évaluation des valeurs d'absorbance mesurées à l'aide de
deux formules de base (soustraction, division).
• Il est possible de varier les formules de base.
• Le résultat peut être évalué avec un facteur, un standard ou une série standard.
• Des méthodes de calcul par soustraction ou division suivi d'une évaluation avec facteur sont
pré-programmées.
6.3 Description de la méthode de la fluorimétrie
6.3.1 Groupe de la méthode Routine
Les méthodes du groupe Routine sont préprogrammées comme méthode fixe. Après modification des
paramètres de la méthode dans les méthodes préprogrammées, il convient donc d'attribuer un nouveau
nom de méthode.
Les méthodes préprogrammées suivantes se basent sur les directives de travail de la société Invitrogen
pour le réactif correspondant. La réalisation de ces procédés pourrait requérir une licence de la société
Molecular Probes, Inc., Eugene, OR, USA ou Invitrogen Corporation, Carlsbad, CA, USA.
Nucleic acids
Détermination de la concentration fluorimétrique des acides nucléiques après réaction avec les réactifs.
• Mesure de l'ADN avec PicoGreen, évaluation avec la courbe/droite standard.
• Mesure de l'ADN avec RiboGreen, évaluation avec la courbe/droite standard.
• Mesure des oligonucléotides avec OliGreen, évaluation avec la courbe/droite standard.
Les variantes des programmes des méthodes ont été programmées comme "short methods". Dans les
"short methods", vous ne pouvez effectuer les mesures qu'avec deux standards (standard nul et un autre
standard). Les résultats ne sont pas aussi précis que lors de la mesure avec plusieurs standards,
l'exactitude est toutefois suffisante pour de nombreux objectifs puisque la courbe standard (rapport entre
le signal de mesure et la concentration) est presque linéaire.
• Mesure de l'ADN avec des réactifs Qubit, évaluation avec la courbe/droite standard.
Pas de "short method" puisque la courbe standard n'est pas linéaire.