Hoefer HE33 - Manuel (Page 22)

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Exemple de tampon de chargement
Chargement du tampon
(5X, 25% de Ficoll 400,
0,25% bleu de bromophénol
† , 10 ml)
Déminéralisée H
2
O à 7,0 ml
Ficoll 400 2,5 g
Bleu de bromophénol (FW 691,9) 25,0 mg
Déminéralisée H
2
O à 10,0 ml
Ajouter à l’échantillon en proportion telle sorte que 1/5
du volume final est de chargement du tampon. (Tam-
pon de chargement augmente densité de la solution.)
Remarque 1: Saccharose ou de la glycérine peut être
utilisée à la place de Ficoll 400.
Remarque 2: Xylene cyanol (0,25%), qui migre plus
lentement que le bleu de bromophénol, peuvent être
ajoutés comme un marqueur supplémentaire, si désiré.
La concentration en agarose détermine la position des
bandes de colorant par rapport à un polynucléotide.
† Suivi des colorants peuvent être omis pour éliminer occultant et
en faisant glisser les effets causés par comigration avec de petits
acides nucléiques.
Tableau 3: spécifications peigne et des volumes puits
volume de
l’échantillon
par une
numéro do nombre épaisseur largeur profondeur
de code peigne de puits (mm) puits (mm) de 1 mm (µl)
HE31A-P-1.0 1 prep/2 ref 1,0 44/6 44/6*
HE31A-P-1.5 1 prep/2 ref 1,5 44/6 66/9*
HE31A-8-1.0 8 1,0 6,5 6,5
HE31A-8-1.5 8 1,5 6,5 9,7
HE31A-12-1.0 12 1,0 3,9 3,9
HE31A-12-1.5 12 1,5 3,9 5,8
HE31A-16-1.0 16 1,0 2,6 2,6
HE31A-16-1.5 16 1,5 2,6 3,9
* Le préparative forme à deux peignes de référence (normes pour MW)
de puits, un de chaque côté de l’préparative puits. Le premier nombre
est le volume d’échantillon/mm dans le puits de préparation, le second
est le volume/mm dans le puits de référence.