Hoefer HE33 - Manuel (Page 16)

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Rapides, à haute tension pistes
Certaines applications, telles que le dépistage des
échantillons ou le contrôle de la pureté de l’échan-
tillon, qui peut être accompli rapidement dans des
conditions de tension. Refroidir la base (-20 °C) et de
limiter la course de 5 minutes ou moins à 500 V.
Plus lent, moins de tension fonctionne
Un gradient de tension de 12 V/cm (150 V) sépare
0,1 à 23 kb fragments d’une digestion Hind III de λ
ADN dans 30 à 40 minutes (en utilisant 1% d’aga-
rose gel et du tampon TBE 0.5X en cours d’exécu-
tion). Sinon, en utilisant les mêmes solutions, cet
échantillon peut être exécuté à 24 V/cm (300 V) avec
une résolution de bande acceptable dans 20 à 30
minutes. Réfrigérer la base avant utilisation.
Tableau 1: paramètres de tension et les
paramètres recommandés terme †
tension pente temps
(V) (V/cm) (min)
500 40 5*
400 31 10*
300 24 20*
200 16 30 à 40
150 12 30 à 60
* Pour les cycles rapides de 20 minutes ou moins, utilisez
TBE 0.5X et réfrigérer la base à -20 °C avant utilisation.
† Tension et les temps sont pour 1% d’agarose NA, TBE 0.5X
et une base réfrigérés.
Après la séparation

Important! Coupez l’alimentation électrique, débran-
chez les fils, et retirez le couvercle.

Si aucune bromure d’éthidium est ajouté au gel ou
de l’échantillon avant l’exécution, d’un colorant du
gel dans une solution de 0,5 à 1,0 µg/ml de bromure
d’éthidium dans l’eau ou un tampon.

Nettoyez l’unité tel que décrit ci-dessous.
Remarque: pour calculer le
gradient de tension, diviser le
réglage de la tension par la
distance entre les électrodes
(12,7 cm).