Hoefer HE33 - Manuel (Page 12)

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Préparer des solutions

Préparez 250 ml de tampon. (Reportez-vous à la page
12 pour des recettes de couramment utilisés électro-
phorétiques tampons en cours d’exécution.)

Préparer le tampon de chargement de l’échantillon.
(Reportez-vous à la page 14 pour une recette et un
tableau des conditions de volume pour chaque taille
de peigne.)

Préparer environ 7 ml solution d’agarose par mm
d’épaisseur sur gel. (Par exemple, un gel de 3 mm
nécessite 0,3 cm × 7 cm × 10 cm = 21 ml)
Dissoudre l’agarose dans la gestion de mémoire tam-
pon, la chaleur selon les instructions accompagnant
l’agarose, et laissez la solution refroidir à 50 °C avant
de verser dans le bac de coulée.
Facultatif: Ajouter 0,5 µg/ml de bromure d’éthidium
à la solution de gel d’observer la séparation pendant
l’électrophorèse.
Attention: Le bromure
d’éthidium est un mutagène
connu. Toujours porter des gants
lors de la manipulation.
Fig 2. Kit de coulage de gel.
Approcher le tampon de mousse
avec une extrémité du plateau
en cours d’exécution et ensuite
doucement appuyer sur le bord
du bac contre le patin, comprimer
suffisamment pour permettre
à l’extrémité opposée du bac
en cours d’exécution à déposer
entièrement dans le bac de coulée
avant de sceller contre le tampon
de mousse.
Transparent aux UV
bac exécutant
(Jeter le gel sur
ce plateau, puis
transfert à la
base de gel unité
horizontale pour
l’électrophorèse.)
plateau de
coulage
de gel plots de
mousse (2)