Hoefer SE300 miniVE - Manuel (Page 17)

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Attention! L’acrylamide est une
neurotoxine. Toujours porter
des gants et observer toutes
les procédures de sécurité en
laboratoire.
Note: Environ 10 ml de solution
de monomère est nécessaire de
jeter un 1 gel mm d’épaisseur.
A 1 cm de gel d’empilement inférieur au puits
Remplissez à 3 cm en dessous du haut de la
plaque de verre rectangulaire. Superposer chaque
gel avec une mince couche d’eau saturée du
n-butanol, de l’eau, ou un tampon de gel dilué
pour éviter d’exposer la solution de monomère
à l’oxygène. Utilisez une seringue en verre munie
d’une aiguille de calibre 22 d’appliquer 100 µl de
la solution de superposition lentement d’un côté
du sandwich, à proximité de l’entretoise. Laisser
la solution s’écouler à travers la surface tout seul.
Après polymérisation

Prévoir un minimum d’une heure pour le gel à
polymériser.

Si un peigne est en place, retirez-le en tirant délicate-
ment sur le peigne tout doucement bercer d’avant
en arrière pour casser le vide. Rincer les puits avec
du tampon d’électrophorèse pour enlever toute
l’acrylamide non polymérisé.
Si une superposition a été appliquée, rincer le sand-
wich à plusieurs reprises avec de l’eau bidistillée pour
l’enlever. Inverser le module de s’écouler.
Pour assurer un contact continu entre la résolution
et d’empilage des gels, enlever le liquide résiduel en
tapant un coin du gel avec un tissu non pelucheux.
Couler le gel d’empilement

Préparer la solution de gel d’empilement monomère.

Désaérer la solution monomère gel d’empilement,
ajouter de catalyseur et un initiateur et verser.
Utiliser une pipette pour fournir la solution dans un
coin de la plaque, en prenant soin de ne pas piéger
les bulles.