Eppendorf BioSpectrometer fluorescence - Manuel (Page 33)

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Méthodes
Eppendorf BioSpectrometer ® fluorescence
Français (FR)
6.2 Description des méthodes utilisées en photométrie
Ce chapitre est consacré aux méthodes pré-programmées et aux modèles de méthodes.
6.2.1 Groupe de méthodes Absorbance
Single λ
• Mesure de l'absorbance à une longueur d'onde.
• Pas d'évaluation connectée en aval.
Multi λ
• Mesures de l'absorbance pour deux à six longueurs d'onde.
• Pas d'évaluation connectée en aval.
Scan
• Mesure d'un spectre de longueurs d'onde d'absorbance via une plage de longueurs d'onde définie.
• Affichage de la longueur d'onde et de l'absorbance du spectre en naviguant avec un curseur de
longueur d'onde.
• La section du spectre peut être modifiée à l'aide de 3 différentes variantes de zoom.
• Identification des pics possible.
6.2.2 Groupe de méthodes Routine
Les méthodes du groupe Routine sont pré-programmées sous forme de méthodes fixes. Après avoir
modifié les paramètres dans les méthodes pré-programmées sur des valeurs fixes, il faudra donc modifier
le nom de la méthode.
Nucleic acids
• Détermination de la concentration des acides nucléiques par une mesure effectuée à 260 nm et une
évaluation avec facteur.
• Différentes méthodes d'évaluation de l'acide nucléique comme dsADN ou ARN sont pré-programmées
dans le système. Les paramètres se distinguent au niveau du facteur.
• Méthode pré-programmée pour les cuves de microlitres : mesure de l'ADN dans des microlitre(s)
d'échantillons avec faisceau lumineux de 1 mm (avec cuves de l'ordre du microlitre comme Eppendorf
μCuvette G1.0 ou Hellma
® TrayCell).
• Informations complémentaires sur la pureté de l'acide nucléique mesuré : rapport A260/A280, rapport
A260/A230, spectre de longueurs d'onde d'absorbance pour l'acide nucléique, absorbance de la
longueur d'onde d'arrière-plan (pré-réglage : 320 nm; l'absorbance de l'acide nucléique pur devrait être
ici autour de zéro).
• Correction partielle de la turbidité possible à l'aide du paramètre Background.
• Conversion des concentrations en concentrations molaires et (après la saisie du volume de l'échantillon)
possibilité de conversion en quantités d'acide nucléique (étape : process results).