Eppendorf BioSpectrometer fluorescence - Manuel (Page 100)

Procédés d'évaluation
Eppendorf BioSpectrometer
® fluorescence
Français (FR)
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12.7 Dual wavelength
Pour les méthodes du groupe Dual Wavelength, les extinctions qui ont été mesurées sur deux longueurs
d'onde peuvent être déduites l'une de l'autre avant que l'extinction calculée ne soit intégrée à l'évaluation
ultérieure avec facteur ou standard.
Pour déterminer l'extinction calculée, on peut définir dans les paramètres une évaluation par division ou
par soustraction :
A
1
, A
2
= extinctions mesurées.
a, b, c, d = facteurs saisis dans les paramètres. Il est également possible de saisir des valeurs négatives.
12.8 Fluorimétrie
12.8.1 Valeurs RFU
Relative Fluorescence Unit : les valeurs RFU sont une mesure pour la fluorescence mesurée.
Contrairement aux valeurs d'extinction en photométrie, les valeurs RFU ne sont pas comparables
d'appareil en appareil mais doivent toujours être basées sur les standards de la fluorescence ou
concentration connue.
12.8.2 Blanc
Toutes les valeurs RFU sont toujours basées sur le dernier blanc mesuré (valeur à blanc).
Une mesure à blanc est donc obligatoire au début de chaque série de mesures et est également possible
pendant une série de mesures. La mesure à blanc devrait idéalement pouvoir compenser toutes les
possibilités d'influence sur la valeur RFU de la solution de mesure. Le blanc devrait donc être mesuré avec
le tampon également utilisé pour la mesure des échantillons et dans la même cuve que la valeur de
l'échantillon - à moins que les cuves utilisées pour la mesure à blanc et des échantillons soient ajustées
visuellement l'une par rapport à l'autre, possèdent donc la même valeur RFU que pour la longueur d'onde
de mesure.
d c
A b
A a
A
calc
 u
u
u
2
1
> @
d c A b A a A
calc
 u u  u
2 1