Hoefer TE22 - Manuel (Page 16)

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L’assemblage final et le transfert
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Installer le couvercle du
Les cassettes sont codés par couleur pour correspondre
à des fils dans le couvercle. Pour transférer vers
l’anode, d’orienter le couvercle de sorte que la moitié
de gris de la cassette face à l’anode (+), ou fil rouge,
et la moitié noire de la cassette face à la cathode (–),
ou de plomb noir. Assurez-vous que les fiches banane
siège dans les connecteurs dans le couvercle.
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Utilisez uniquement un alimentations approuvées
telles que le Hoefer PS2A200, PS200HC, ou
PS300B. Assurez-vous que l’alimentation est coupée
et tous les contrôles sont mis à zéro. Branchez les fils
à code couleur du couvercle de l’unité de transfert
dans l’offre de la puissance cordon rouge dans la prise
rouge de sortie, et le fil noir à la sortie de black jack.
Dans la plupart des systèmes, le fil rouge est l’anode
(+), et le fil noir est la cathode (–).
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Le refroidissement est fortement recommandé
Tout paramètre que les résultats dans l’enseignement
supérieur de 5 W de puissance va générer assez de
chaleur pour exiger le contrôle de la chaleur active.
Un bain circulateur réfrigéré avec de l’eau doit être
réglé à environ 10 °C. (Si vous utilisez glycol 50/50
d’éthylène/eau, la température peut être réglée plus
bas.) Refroidissement la mémoire tampon avant d’uti-
liser si possible.
Remarque: Prenez soin dans
l’orientation du couvercle de sorte
que toutes les espèces migrent
vers la membrane lorsque le
champ électrique est appliqué.
La direction de migration dépend
à la fois les caractéristiques de
l’échantillon et le pH du tampon
de transfert. Si les espèces d’in-
térêt chargée négativement est
dans le tampon de transfert et la
pile est assemblée de sorte que
la membrane est plus proche du
côté de gris de la cassette, puis
ce côté fait face à l’anode (+). La
plupart des protéines migrent vers
l’anode dans le Towbin Tris/glycine
système tampon/méthanol (indé-
pendant de la présence de SDS),
et dans la plupart des conditions,
des acides nucléiques sont char-
gés négativement et migrent égale-
ment vers l’anode.
Important! Ne jamais laisser la
température du tampon de dépas-
ser 45 °C. La chaleur excessive
entraîne l’unité de se déformer.
Paramètres de transfert typiques
Paramètres de votre échantillon et le système tampon
doit être déterminé de manière empirique.
Protéine Acides nucléiques
Tampon Towbin 1X TBE ou 1X TAE
Courant (A) 0.4 0.3
Tension (V) ~100 50
Temps transfert ~1 heure ~1 heure
Liquide 10 °C 10 °C ou moins
refroidissement temp.