Hoefer TE22 - Manuel (Page 13)

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Préparez deux longueurs de 9 mm en vinyle ou en
tube de silicone. Colliers de serrage coulissant (4 au
total) à chaque extrémité de deux longueurs de tube.
Fixez une extrémité de chaque longueur de tuyau à un
port échangeur de chaleur. Fixez le libre extrémités
de chaque longueur de tuyau à des ports de bain de
circulateur;. un à l’entrée et l’autre à la sortie sécurisé
les connexions avec les colliers de serrage.
3
Lieu (ne pas tomber) un agitateur magnétique dans
le réservoir tampon. (Faire tomber des objets dans
le réservoir peut se fissurer la plaque d’alumine.)
Réglez l’appareil sur un agitateur magnétique et
remplir tampon de transfert à la «Démarrer le niveau
de remplissage» en ligne sur le front de la cuve. (Cela
nécessite environ 0,7 litres.)
4
Régler l’agitateur à faible et moyen, qui accomplit
circulation du tampon sans forcer tampon à travers
les cassettes.
Monter la cassette de transfert
1
Pré-humide nitrocellulose ou des membranes de nylon
avec de l’eau distillée. Pré-humide PVDF ou d’autres
membranes hydrophobes dans le méthanol. Puis trem-
per tous les types de membranes dans un tampon de
transfert pendant 2-5 minutes.
2
Ouvrir la cassette en libérant les deux languettes de
verrouillage le long du bord opposé des charnières.
Placez la cassette ouvert dans un bac rempli d’au
moins 3 cm de tampon de transfert.
3
Assembler la pile de transfert afin que les molécules
vont migrer vers la membrane. Pour macromolécules
chargées négativement (comme les acides nucléiques
et la plupart des protéines), la construction de la pile
sur la moitié de gris de la cassette (puis plus tard,
positionner le couvercle de sorte que le côté gris fait
face le fil rouge, ou anode (+).
Remarque: Toujours porter des
gants lorsque vous manipulez des
membranes pour éviter d’avoir des
empreintes digitales sur eux.
Important! Prenez grand soin de
retirer toutes les bulles d’air à
chaque étape car la présence de
bulles d’air, en particulier entre la
membrane et le gel, le transfert
de blocs.
Remarque: Même si aucun système
de refroidissement est nécessaire
pour votre système, le tampon
doit être distribué avec un agita-
teur pour éviter l’épuisement de
tampon au niveau des électrodes.