Jenway Genova Plus French - Manuel (Page 17)

La concentration d'acide nucléique peut également être estimée à l'aide des calculs suivants :
Conc (µg/ml) = (Abs@260 nm x 62,9) - (Abs@280 nm x 36,0)
Conc (µg/ml) = (Abs@260 nm x 49,1) - (Abs@230 nm x 3,48)
Il est fréquemment nécessaire de se référer à une valeur blanche lorsqu'aucune absorption ne doit se produire.
La longueur d'onde de référence par défaut du Genova Plus est de 320 nm et l'utilisateur peut inclure la valeur
d'absorbance mesurée dans tous les calculs d'acide nucléique. Si nécessaire, la longueur d'onde par défaut de
320 nm peut être modifiée.
3.3 MESURE DE SPECTROSCOPIE
Le spectrophotomètre se compose de quatre composants principaux. Ces composants sont une source lumineuse
servant à émettre une quantité d'énergie élevée et constante sur l'ensemble de la plage de longueur d'onde ; une
méthode de séparation de la lumière en longueurs d'onde distinctes ; un support d'échantillon et un détecteur de
lumière.
Voici un schéma optique du spectrophotomètre Genova Plus :
Figure 3.3.1 – Schéma de la raie spectrale
La lumière de la lampe au xénon préalignée est orientée sur la mire périodique, avec 1 200 lignes par millimètre,
qui sépare la lumière en longueurs d'onde distinctes. Le spectre diffracté de lumière passe ensuite à travers un
agencement de lentille et de fente éloigné avant de passer à travers l'échantillon dans la chambre de prélèvement de
gauche à droite. La lumière qui n'est pas absorbée par l'échantillon est transmise à travers une lentille convergente
et sur le détecteur de signal. Le détecteur à photodiode utilisé est monté directement sur le circuit imprimé du
détecteur et la sortie sert à calculer le % de transmission. Le résultat s'affiche sous forme de % de transmission ou
d'absorbance sur l'écran de l'appareil.
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Lampe
Échantillon
Lentille convergente
Miroir collimateur
Détecteur
Fente d‘entrée
Mire périodique
Fente de sortie