Luminex xPONENT 3.1 - Manuel (Page 18)

Manuel d’utilisation du logiciel Luminex xPONENT 3.1
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Volume d’échantillon
Le volume (ou la taille) des échantillons doit être compris entre 10 et 200 µl. Assurez-vous
qu’une partie de l’échantillon reste dans la cupule après aspiration (environ 25 µl de plus que
le volume d’échantillon) Cette quantité varie selon le type de plaque utilisé. Après acquisition,
l’analyseur Luminex lave les lignes d’échantillons en injectant approximativement 165 µl de
fluide gaine dans la cupule pour une plaque de 96 cupules. Assurez-vous que cette quantité
de fluide peut être ajoutée dans la cupule sans entraîner de débordement et de
contamination d’autres cupules.
Les limites de volume imposées au système d’analyse peuvent être calculées avec la
formule suivante :
Volume total de la cupule (µl) – Volume occupé par l’échantillon (µl) + 165 (µl) < Volume
de cupule maximum (µl)
• Volume total de la cupule = Volume d’échantillon de départ d’une cupule avant
que l’appareil procède à l’acquisition. Le volume de la cupule est déterminé par la
consistance de l’ensemble de billes.
• Volume occupé par l’échantillon = Volume prélevé pour l’acquisition (doit être
programmé dans le protocole en tant que volume d’échantillon).
• 165 µl = Volume rejeté, comme indiqué dans le paragraphe précédent.
• Volume de cupule maximum = Volume maximum des cupules de la plaque de
microtitration à 96 cupules sélectionnée.
Dilution des échantillons
Les échantillons biologiques concentrés, tels que le sérum ou le plasma, doivent être
dilués avec des réactifs à une dilution minimale de 1/5, dans le cadre de la préparation de
l’analyse ou en étape de dilution finale. Si vous utilisez un kit xMAP, suivez les instructions
de dilution fournies avec le kit.
Réactifs
Les réactifs formulés ne doivent contenir aucune autre particule que les billes xMAP.
Les microbilles d’étalonnage ou de vérification xMAP ne doivent pas être diluées.
Portes
Les positions de la porte dépendent de la composition du tampon d’analyse. Toute
modification apportée à la composition des tampons d’analyse risque de changer
l’emplacement optimal des portes.
Déterminez les portes du discriminateur de doublet d’une analyse lors de la mise au point
de cette analyse. Les valeurs numériques sont affichées à gauche de l’histogramme. La
position numérique des portes, déterminée lors de la mise au point de l’analyse, permet
de définir l’emplacement des portes dans le protocole.
Les informations relatives aux portes sont susceptibles de changer à chaque nouveau
lot de billes xMAP. Lorsque vous recevez un nouveau lot de billes, évaluez-les avec les
protocoles actuels. Si les informations relatives aux portes changent, créez un nouveau
protocole, identique au protocole actuel, mais avec un nouveau numéro de version et de