Hoefer SE900 - Manuel (Page 28)

• p22
Problème Solution
Problèmes de l'instrument:
Pas de tension ou de courant au L'instrument n'est pas correctement fixé à l'alimentation. Assurez-vous que
début de la course fils à haute tension sont connectés en corriger les bornes + / - et est
sécurisé. Dans certains cas, des adaptateurs peuvent être nécessaires.
Électrode brisé. Vérifier la continuité du fil avec un voltmètre.
Couvercle pas bien fixé sur les fiches bananes. Repositionner et vérifier le
couvercle est bien fixé en place.
Rupture dans la ligne de plomb HV. Vérifier la continuité du fil avec
un voltmètre.
2D Problèmes Résultats:
Stries verticales de l'échantillon à partir du Bande de IPG pas correctement placé sur la surface du gel. Évitez gel
haut du gel vers le bas du gel gougeage séparer pendant le chargement des bandes.
Effectuer le traitement iodoacétamide.
Assurez-vous que la bande IPG uniformément en contact avec la surface du
gel sur toute la longueur de la bande.
Surcharge de la protéine.
Stries horizontales de protéines La préparation des échantillons pauvres.
Mise au point inadéquates.
Mauvais contact entre la bande et le gel IPG deuxième dimension.
Les places sont biaisées ou déformées Gels courir trop vite-inégale de la migration.
Superposer le gel de résolution à l'eau saturée en n-butanol avant polyméri-
sation commence à éviter la formation d'une surface du gel inégale.
Polymérisation en gel ou de la formation inégale gradient. Voir coulée des
problèmes pour plus de soutien.
Bande IPG pas correctement placé sur la surface du gel. Évitez gel gougeage
séparer pendant le chargement des bandes.
Exemple d'entrée dans le gel deuxième dimension est exécuté à une
trop grande réglage de puissance. Exécuter des gels dans des conditions
d'exécution recommandées.
Bulles présentes dans le gel de deuxième dimension va fausser la
migration place.
Pas de protéines visibles sur un gel de Quantité chargé trop peu pour la méthode de détection. Augmenter la charge
deuxième dimension après coloration de protéines ou d'essayer une méthode de coloration plus sensible.
Échantillon trop peu appliquée au gel première dimension. Vérifiez la
concentration de protéines de l'échantillon.
Équilibration étapes trop court ou trop long. Effectuez chaque étape
d'équilibration pendant 10-15 minutes.
Régions vierges dans le gel deuxième dimension Tris, sels, et le SDS peut entraîner une modification de la position de focali-
sation de protéines dans la première dimension. Réduire ou éliminer ces
composés à partir de la première dimension.
Bulles entre la bande et le gel de seconde dimension.