Hoefer SE600X Chroma - Manuel (Page 32)

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Table 2: Laemmli buffer system
starting point guidelines
Épaisseur du gel* 1,5 mm
Courant par gel † 25 mA
à courant
constant
À partir de tension ‡ 80 – 90 V
Tension finale 220 – 250 V
* Les gels plus ou moins épais nécessitent
proportionnellement plus ou moins de
courant. Par exemple, un gel de 0,75 mm,
qui est la moitié de l’épaisseur d’un gel
de 1,5 mm, exige que la moitié autant de
courant, ou 12,5 mA.
† Le courant doit être multiplié par le
nombre de gels. Par exemple, si deux clubs
sandwichs sont installés, les quatre gels
besoin de quatre fois plus de courant. Le
courant peut être augmenté pour accélérer
le parcours si le refroidissement actif est
utilisé et il peut être diminué pour plus
lentes pistes la nuit.
‡ A 25 mA par gel.
Remarque: SE600 Chroma
unité utilise 18 cm de large
plaques. L’épaisseur du gel
détermine la section transversale
(et l’exigence actuelle) pour
constants pistes actuelles. La
longueur de la plaque détermine
le temps d’exécution.
Séparation de l’échantillon
Paramètres d’électrophorèse pour des gels
de polyacrylamide discontinus
Les gels peuvent être exécuté à chaque constants
courants ou constants réglages de tension. Un
mode courant constant est traditionnellement
utilisé avec un système tampon discontinu de
sorte que le taux de migration électrophorétique
reste inchangé pendant toute la course. Dans ces
conditions de tension augmente à mesure que le
produit terme. Une valeur inférieure actuelle est
recommandé pour une meilleure résolution. Le
niveau optimal de courant doit être déterminé
de manière empirique, les principaux facteurs
qui doivent être équilibrés comprennent la
concentration du gel et de la vitesse de migration,
et le chauffage par effet Joule et la distorsion
résultant de bande. Tableau 2 énumère les lignes
directrices à partir de point et les ajustements pour
l’épaisseur du gel, le nombre de gels, et taux de
migration.
Courant
Courant agit sur l’ensemble de la section
transversale de tous les gels, parce que les gels sont
connectés en parallèle dans le circuit électrique.
Ainsi le réglage actuel pour un gel de doit être
multiplié par le nombre de gels de la même section
transversale d’exécution simultanément. Pour un
gel 1,5 mm d’épaisseur, nous vous proposons une
mise de départ de courant de 25 mA. (Deux de 1,5
mm gels = 50 mA.)
Remarque: Le refroidissement peut être nécessaire
pour contrôler le chauffage par effet Joule.