Leica Biosystems PELORIS_PELORIS II - Manuel (Page 152)

Dépannage
Leica PELORIS Manuel d’utilisation Rév K © Leica Biosystems Melbourne Pty Ltd 2011 152
Les réactifs de nettoyage du préparateur fournissent une méthode automatique pratique pour
éliminer la paraffine et remettre le tissu dans l’alcool. Toutefois, cette méthode peut être plus rude
que les méthodes A ou C.
C. Processus lent inversé
Processus utilisant un protocole de nettoyage modifié durant une période égale au temps requis
pour continuer le traitement du tissu (voir Protocole de nettoyage inversé lent ci-dessous). Puis
retraitez au formol en utilisant un programme adapté à la taille et la nature du spécimen (voir 8.2.1
Type d'échantillon et durée d'un protocole).
Un processus lent inversé est très favorable pour le tissu. Si le temps le permet, c’est la meilleure
option.
D. Retraitement direct
Avec cette méthode, la paraffine n’est pas éliminée avant le retraitement. Replacez les cassettes
directement dans le formol, puis sans aucun autre prétraitement, retraitez en utilisant un
programme adapté à la taille et à la nature du spécimen (voir 8.2.1 Type d'échantillon et durée d'un
protocole).
Bien que cette méthode soit la plus rapide, elle entraîne une contamination à la paraffine des
réactifs sur le préparateur. Changez tous les réactifs (sauf la paraffine) après le retraitement direct.
7. Tissu affecté par le formol durant le rinçage ou l’infiltration de
paraffine
Ce problème peut survenir si une valve qui fuit permet le reflux du formol dans le bain de paraffine.
Contactez l’assistance client pour tester l’appareil si vous rencontrez ce problème.
Une contamination au formol est caractérisée par une nuance bleue dans les noyaux, la perte de
détail de la chromatine, le rétrécissement nucléaire, une éosinophilie variable et un gonflement et/
ou rétrécissement cytoplasmique.
Vous devez d’abord faire fondre les blocs, éliminer l’excès de paraffine puis placer les spécimens
dans de nouvelles cassettes. Ceci minimise la contamination à la paraffine des réactifs de
préparation des échantillons. Puis procédez à un traitement inversé des blocs en suivant l’une des
méthodes listées pour le problème 6. Ensuite, trempez dans une solution de prélèvement à pH
élevé Tris-HCl (par ex. solution de prélèvement Bond Epitope 2) pendant 2–12 h à température
ambiante.
Ce traitement permet d’améliorer les qualités de coloration de HE & HES, les qualités de coupe du
tissu et la cohésion de la coupe. Le détail nucléaire, le gonflement cytoplasmique et la définition ne
sont probablement pas améliorés.
8. Tissu sous-traité fixé de manière inadéquate
Un remède possible est d'effectuer un traitement inversé lent du tissu (voir 6C), d'appliquer une
fixation au formol additionnelle, puis de retraiter en utilisant un programme adapté à la taille et à la
nature du spécimen (voir 8.2.1 Type d'échantillon et durée d'un protocole).
Un tissu non fixé ou fixé de manière médiocre est endommagé en traitant à l’alcool et des
températures élevées exercent un effet de fixation différent de celui du formaldéhyde. Par