Leica Biosystems PELORIS_PELORIS II - Manuel (Page 151)

Dépannage
Leica PELORIS Manuel d’utilisation Rév K © Leica Biosystems Melbourne Pty Ltd 2011 151
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50 ml 1 % de formol aqueux
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30 ml 96 % d’éthanol
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20 ml 5 % de carbonate de sodium
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Éthanol-glycérol
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90 ml 60 % d’éthanol
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10 ml glycérol
Puis traitez le tissu normalement.
4. Tissu dur, ridé et desséché mais traité dans la paraffine
Éliminez la paraffine et réhydratez tel que décrit dans le problème 6, ci-dessous. Appliquez une
solution de reconstitution tel que décrit dans le problème 3.
5. Tissu insuffisamment infiltré avec la paraffine
Replacez les cassettes dans le bain de paraffine en appliquant un vide et en actionnant l’agitateur à
une température de 65ºC. Cette procédure peut être nécessaire lorsque le tissu a été retiré
prématurément de la paraffine.
6. Tissu sous-traité fixé de manière appropriée
Ce problème peut être dы а un protocole trop court, un spécimen trop grand ou une défaillance du
préparateur. Quatre méthodes sont recommandées, mais le problème doit d’abord être identifié et
corrigé. Testez la correction en passant un tissu de contrôle dans le préparateur avant de retraiter
le tissu du patient (ou utilisez un autre préparateur).
Pour toutes les solutions suivantes, vous devez d’abord faire fondre les blocs, éliminer l’excès de
paraffine puis placer les spécimens dans de nouvelles cassettes. Ceci minimise la contamination à la
paraffine des réactifs de préparation des échantillons.
A. Méthode de Taggart
Placez les cassettes dans un bécher de solution saline isotonique (solution aqueuse de 0,9 % de
chlorure de sodium) dans un incubateur à 65 ºC pendant 1 h. La paraffine monte à la surface.
Retirez le tissu et retraitez dans du formol en utilisant un protocole adapté à sa taille et à sa nature
(voir 8.2.1 Type d'échantillon et durée d'un protocole).
La solution saline réhydrate le tissu en douceur et il peut ensuite être traité normalement. La
solution saline est un réactif non toxique qui peut être utilisé en toute sécurité dans un laboratoire
ouvert.
B. Traitement rapide inversé
Processus utilisant un protocole de nettoyage rapide modifié (voir Protocole de nettoyage inversé
rapide ci-dessous). N’utilisez pas le protocole de nettoyage rapide par défaut ou les protocoles
dérivés, car ils se terminent par une étape de séchage qui endommage le tissu. Après le protocole
de nettoyage, retraitez avec du formol en utilisant un programme adapté à la taille et à la nature du
spécimen (voir 8.2.1 Type d'échantillon et durée d'un protocole).