Hoefer SE250 - Manuel (Page 25)

Appendice
Le système suivant Laemmli est légèrement
modifié pour une utilisation avec les unités de
mini-verticales. Le système de Laemmli est le
protocole le plus courant pour électrophorèse
SDS-dénaturées protéines. L'ion conduisant dans
ce système tampon discontinue est le chlorure et
l'ion de fuite est la glycine. Par conséquent, le gel
de résolution et le gel d'empilement contiennent
Tris-Cl tampons (de la concentration différente
et pH), et le tampon d'électrophorèse contient
du Tris-glycine. Tous les tampons contiennent
0,1% de SDS.
Composition de gel de polyacrylamide est
indiqué par deux pourcentages différents:
% T = total acrylamide = g (acryl + bis) × 100
100 mL
% C = crosslinker = g (bis) × 100
g (acryl + bis)
Le pour cent total de l'acrylamide (% T) dans le
gel de séparation, qui peut varier de 5 à 20%,
détermine la taille des pores. Couramment, la
quantité de réticulant utilisé (% C) est de 2,6%.
Dans le système exemple suivant, la composition
de gel de résolution est de 10% T, 2,6% de C,
qui se traduit par une taille de pore moyenne.
La composition de gel d'empilement est T
4%, 2,6% C. Le T% dans le gel d'empilement
est inférieur à cause une taille plus grande est
requise des pores.
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SE250 résultats:
Piste 1: SDS-6H, haute MW
mélange type, Sigma™
Voie 2: SDS-7 Dalton Mark
VII-L™, Sigma (10 pi par voie)
Gel
12% Vitrail SDS-PAGE au bleu
de Coomassie
Conditions de fonctionnement
20 mA, à une heure