Hoefer SE250 - Manuel (Page 18)

Remarque: Les puits secondaires
pour les normes d'un peigne
préparatif correspondent aux
puits extérieur la plupart formés
par les rayons de 10 puits.
Remarque: Le montant de
l'échantillon de protéine
ajouté à chaque puits dépend
à la fois la sensibilité de la
méthode de coloration et de
la distribution de la protéine
chez les bandes de fréquences
séparées. Avec Coomassie™
Blue, il est possible de détecter
1 µg dans une seule bande,
avec des taches d'argent les
plus sensibles, il est possible de
détecter aussi peu que 10 ng.
tillons de protéines, ajouter des volumes égaux de
tampon et ddH
2
O pour atteindre la concentration
souhaitée. Chauffer le tube dans l'eau bouillante
pendant 90 secondes, puis le refroidir dans la glace
jusqu'au moment de servir. Échantillons traités
peuvent être conservés congelés pour les courses à
venir. (Conserver à -40 °C à -80 °C.)
3
Pour faciliter le chargement des échantillons, mouiller
le décalque bien la localisation et l'appliquer à l'avant
de la plaque de verre de telle sorte que le bord appro-
prié décrit les puits d'échantillon.
4
Remplir le puits échantillon et chaque chambre tampon
supérieure qui seront utilisés avec tampon. Une cham-
bre tampon supérieure détient environ 75 ml.
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Sous-tendaient l'échantillon dans les puits à l'aide
d'une microseringue à pointe fine. La largeur des
puits en fonction du nombre de puits par peigne. Si
le peigne comporte moins de puits, elles sont plus
larges, et nécessitent un plus grand volume d'élever
le niveau de 1 mm, comme indiqué dans le tableau
suivant.
Volume de l'échantillon (µL) par une profondeur de 1 mm
nombre de épaisseur de peigne (mm)
puits 0,75 1,0 1,5
5 9,5 12,7 19,1
9 5,8
10 3,6 4,8 7,2
15 2,2 2,9 4,4
18 2,9
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