Hoefer IEF100 - Manuel (Page 60)

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IPG solution de réhydratation bande
2A. Solution mère de l’urée de réhydratation
Prépare 50 ml
8 M d’urée, CHAPS 2%, 0,002% bleu de bromophénol
Concentration finale Montant
Urée (FW 60.06) 8 M 24 g
CHAPS 2% (w/v) 1,0 g
Bleu de bromophénol 0,002% 1 mg
l’eau déminéralisée à 50 ml
Magasin en 3 aliquotes ml à -20 °C ou au-dessous. 3 ml est suffisante pour
réhydrater six bandes IPG 24 cm.
Juste avant d’utiliser pour IPG réhydratation bande:
• Ajouter 0,5-2,0% (v/v) des ampholytes porteurs (SERVALYTS).
• Ajouter à 9 mg TNT par 3 aliquote ml de solution mère de réhydratation
20 mM de DTT.
• Échantillon de protéine peut également être ajouté à la 3 ml d’une
solution de réhydratation.
2B. Solution de Thio Banque de réhydratation
Prépare 50 ml
7 M d’urée, 2 M thiourée, CHAPS 2%, 0,002% bleu de bromophénol
Concentration finale Montant
Urée (FW 60.06) 7 M 21 g
Thiourée (FW 76.12) M 2 7,6 g
CHAPS 2% (w/v) 1,0 g
Bleu de bromophénol 0,002% 1 mg
l’eau déminéralisée à 50 ml
Magasin en 3 aliquotes ml à -20 °C ou au-dessous. 3 ml est suffisante pour
réhydrater six bandes IPG 24 cm.
Juste avant d’utiliser pour IPG réhydratation bande:
• Ajouter 0,5-2,0% (v/v) des ampholytes porteurs (SERVALYTS).
• Ajouter à 9 mg TNT par 3 aliquote ml de solution mère de réhydratation
20 mM de DTT.
• Échantillon de protéine peut également être ajouté à la 3 ml d’une
solution de réhydratation.