Hoefer HE-PLUS System - Manuel (Page 16)

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C. Retrait de la Peigne
1
Lorsque le gel est solidifié et totalement opaque,
retirez soigneusement le peigne avec une douce
remuant, mouvement vers le haut. Si le peigne est
difficile à retirer ou si un gel faible pourcentage
est utilisé, superposer la zone peigne avec un petit
volume de tampon d’électrophorèse 1X pour préserver
l’intégrité du puits. Vérifiez les puits pour s’assurer
que leurs bases sont intactes.
D. Chargement des échantillons sur le gel
1
Retirez le bac de coulée contenant le gel d’agarose
trempé de l ‘appareil de coulée en soulevant les
extrémités. Placez le bac et le gel dans l’ensemble
de l’unité principale de telle sorte que les puits
d’échantillon sont sur la même extrémité que le
négatif (noir) de l’électrode.
2
Remplissez l’unité avec le tampon d’électrophorèse
contenant 1X restant de bromure d’éthidium fait
précédemment, couvrant le gel à une profondeur de 1
à 5 mm. Environ 350 ml de tampon sera nécessaire.
3
Charger les échantillons dans les puits avec une
micropipette ou un dispositif similaire en prenant
soin de ne pas percer le fond des puits ou de charger
l’échantillon sur la surface du gel.
Remarque: L’utilisation du même
lot de tampon d’électrophorèse
à la fois pour le gel et le tampon
en cours d’exécution est très
important. De légères variations
dans la composition du tampon
entre le gel et le tampon en cours
d’exécution peut entraîner des
gradients ioniques ou de pH qui
peuvent influer considérablement
sur la mobilité des échantillons.