Hoefer SE615 - Manuel (Page 22)

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symptôme cause possible action recommandée
Insuffisante APS ou
TEMED.
Pile APS est humide.
O
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en solution du gel.
Solutions à basse
température.
TEMED est vieux.
Pas assez de réticu-
lation.
Trop bien bis.
Trop bien bis.
Trop de catalyseur:
gel polymérisé dans
<10 min.
Pas assez de cataly-
seur: gel polymérisé
dans >50 min.
Solutions pas mélangées.
Échantillon ne contient
pas même tampon que
gel d’empilement.
Trop de TEMED ou
APS.
Tampon SDS ou de
l’échantillon est vieux.
L’interface entre
les pauvres gel de
séparation et de gel
d’empilement.
Polymérisation incom-
plète.
Gels âgées ou d’acryla-
mide.
Gaz dans le gel.
L’acrylamide ou le bis
contiennent de l’acide
acrylique.
L’eau est impure.
8. N polymérisation de
gel de SDS (ou polymé-
risation incomplète.)
9. Gel trop mou.
10. Gel est fragile.
11. Gel est blanc.
12. Gel contient des
tourbillons, des arte-
facts de polymérisation.
13. Les bandes sont
diffuses ou large.
14. Mobilités protéines
ne correspondent pas.
15. Fond lourd lors de
coloration à l’argent.
Augmenter à la fois l’APS et TEMED de 30-50%.
Solution APS est vieux. Maquillage APS frais
chaque jour.
APS est hygroscopique. Ouvrez une nouvelle
bouteille.
Dégazer au moins 10 minutes.
Assurez-vous que toutes les solutions sont à la
température ambiante (20-30 °C).
Utilisez la nouvelle TEMED.
Crosslinker devrait être de 2,6% pour C gels SDS
standard où
%C = g bis × 100
(g monomer + g bis)
Voir # 9 ci-dessus.
Vérifiez les concentrations de solutions.
Voir # 9 ci-dessus.
Réduire à la fois l’APS et TEMED de 25%.
Augmenter à la fois l’APS et TEMED de 50%.
Voir aussi # 8.
Mélanger soigneusement après addition TEMED.
Utilisez le même tampon pour l’échantillon que
pour le gel de stacking.
Réduire les concentrations de 25%.
Utiliser des solutions fraîches.
Retirer tout le liquide de la surface du gel de
séparation avant d’ajouter les solutions de gel
d’empilement.
Voir # 8.
Ne pas stocker l’acrylamide liquide de plus de
3 mois. Utilisez des gels dans les 1-2 semaines
de casting. Utilisez des gels avec gerbeurs
immédiatement.
Dégazer des solutions de gel d’au moins 10 min.
Utiliser des réactifs spécifiés comme la pureté par
électrophorèse.
Utilisez uniquement de l’eau bidistillée.