Hoefer SE615 - Manuel (Page 14)

Verser des gels de gradient
standards
Voir la figure 1 à la page 4 pour un diagramme
des composants roulettes. Voir «Mise en place
du lanceur» à la page 5 pour des volumes de
solutions recommandées.
Mise en place du fabricant de gradient
1
Préparer une solution de glycérol à 50% de dépla-
cement contenant une petite quantité de bleu de
bromophénol: environ 75 ml pour le SE615 et 35 ml
pour le SE675.
2
Calculer la quantité de solution à gradient vous aurez
besoin en se référant à la formule à la page 9.
Pour une dimension gels: Utilisez un gel de sépara-
tion de 12 cm avec un gel de 4 cm d’empilage.
Pour en deux dimensions utilisant des bandes des
gels IPG: Calculer la quantité de solution nécessaire
pour remplir les sandwichs à environ 0,5 à 1,0 cm en
dessous du haut des plaques.
3
Mettre en place la pompe péristaltique. Utilisation
d’un cylindre gradué et de l’eau, ajuster le débit de
telle sorte que le volume de la solution de séparation
par gradient et le volume de la solution de glycérol est
complètement remis à 10-15 minutes.
4
Choisissez un fabricant de dégradé qui ne détient
pas plus de quatre fois le volume total de solution à
gradient d’être versé. Vérifier que la machine gradient
est propre et que la prise et le port de mélange sont
libres d’acrylamide polymérisé.
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