Eppendorf D30 BioPhotometer - Manuel (Page 31)

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Méthodes
Eppendorf BioPhotometer ® D30
Français (FR)
6.2 Description des méthodes utilisées en photométrie
Ce chapitre est consacré aux méthodes pré-programmées et aux modèles de méthodes.
6.2.1 Groupe de méthodes Absorbance
Single λ
• Mesure de l'absorbance à une longueur d'onde.
• Pas d'évaluation connectée en aval.
6.2.2 Groupe de méthodes Routine
Les méthodes du groupe Routine sont pré-programmées sous forme de méthodes fixes. Après avoir
modifié les paramètres dans les méthodes pré-programmées sur des valeurs fixes, il faudra donc modifier
le nom de la méthode.
Nucleic acids
• Détermination de la concentration des acides nucléiques par une mesure effectuée à 260 nm et une
évaluation avec facteur.
• Différentes méthodes d'évaluation de l'acide nucléique comme dsADN ou ARN sont pré-programmées
dans le système. Les paramètres se distinguent au niveau du facteur.
• Méthode pré-programmée pour les cuves de microlitres : mesure de l'ADN dans des microlitre(s)
d'échantillons avec faisceau lumineux de 1 mm (avec cuves de l'ordre du microlitre comme Eppendorf
μCuvette G1.0 ou Hellma
® TrayCell).
• Informations complémentaires sur la pureté de l'acide nucléique mesuré : rapport A260/A280, rapport
A260/A230, spectre de longueurs d'onde d'absorbance limité pour l'acide nucléique (à des écarts de
3 nm), absorbance de la longueur d'onde d'arrière-plan (prédéfinie : 320 nm; l'absorbance de l'acide
nucléique pur devrait toujours être approximativement zéro).
• Correction partielle de la turbidité possible à l'aide du paramètre Background.
• Conversion des concentrations en concentrations molaires et (après la saisie du volume de l'échantillon)
possibilité de conversion en quantités d'acide nucléique (étape : process results).
Proteins direct UV
• Détermination de la concentration des protéines par une mesure effectuée à 280 nm et évaluation avec
facteur ou standard.
• Méthodes pré-définies pour l'édition directe des absorbances sous forme de résultat (protéine A 280) et
pour l'évaluation réalisée avec des coefficients d'absorbance spécifiques à l'albumine (albumine A 280).
• Méthode pré-programmée pour les cuves de microlitres : mesure de la protéine dans les échantillons de
un ou plusieurs microlitre(s) avec faisceau lumineux de 1 mm (avec cuves de microlitres comme
Eppendorf μCuvette G1.0 ou Hellma
® TrayCell).
• Informations complémentaires sur la pureté de la protéine mesurée : absorbance de la longueur d'onde
d'arrière-plan (prédéfinie : 320 nm; l'absorbance de la protéine pure devrait être ici d'env. zéro).
• Correction partielle de la turbidité possible à l'aide du paramètre Background.
• Lors de la programmation de la méthode, le facteur pertinent est importé en sélectionnant la protéine
dans une liste de prescriptions. Les facteurs sont définis séparément dans les fonctions du groupe Gen.
method param. Différentes protéines sont pré-programmées dans Gen. method param.. Vous pouvez
en ajouter d'autres.