12 exploitation des résultats et conversions, 1 acides nucléiques (adnds, adnss, arn, oligo)) – Eppendorf BioPhotometer Manuel d'utilisation
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12 Exploitation des résultats et conversions
12.1 Acides nucléiques (ADNds, ADNss, ARN, Oligo))
Conversion par facteur
C =
A
260
x F
C
= Concentration calculée
A
260
= Absorbance lue à 260 nm
F
= Facteur (à programmer au cas par cas selon la méthode par la touche
)
Particularité de la méthode pour acides nucléiques: le facteur programmé se rapporte toujours à l'unité de
concentration "
µ
g/mL". Si on sélectionne l'unité de concentration
µ
g/
µ
L, le facteur sera automatiquement
réévalué en interne:
F’ = F / 1000
F’ = Facteur interne converti; est utilisé pour le calcul de la concentration.
Dilution de l'échantillon
C
dil, corr
= C x (V
P
+ V
dil
) / V
P
C
dil, corr
= Résultat calculé avec un facteur de dilution
V
p
= Volume de l'échantillon de la solution lue (saisie par la touche
)
V
dil
= Volume du diluant dans la solution de lecture (saisie par la touche
)
Parcours optique de la cuve
Application: utilisation de cuves de p.o. = 1, 2 ou 5 mm.
Le parcours optique de la cuve est programmé spécifiquement à chaque méthode par la touche
.
A
cuve, corr
= A x 2 (pour un p.o. de 5 mm)
A
cuve, corr
= A x 5 (pour un p.o. de 2 mm)
A
cuve, corr
= A x 10 (pour un p.o. de 1 mm)
A
cuve, corr
= Absorbance rapportée à un parcours optique d'une cuve de 10 mm
Correction A
320
Application: correction partielle pour l'interférence de la turbidité d'une solution lue sur une lecture.
La procédure de conversion avec ou sans correction pour le trouble E
320
est programmée spécifiquement
selon la méthode par la touche
.
A
x, corr
= A
x
- A
320
A
x, corr
=
Absorbance corrigée mathématiquement par les absorbances aux longueurs d'onde 230, 260
et 280 nm
A
x
= Absorbance lue aux longueurs d'onde 230, 260 et 280 nm
A
320
= Absorbance lue aux longueurs d'onde 320 nm
L'absorbance corrigée est ensuite utilisée pour le calcul final du résultat.
Touche "Conversion": calcul des concentrations massiques
Application: détermination de la quantité totale d'acide nucléique dans le volume total d'échantillon
M
= C x V
p, tot
M
= Masse totale d'acide nucléique dans le tube d'échantillon
C
= Concentration calculée
V
p, tot
= Volume de l'échantillon dans le tube (saisie par la touche
)
Parameter
Dilution
Dilution
Parameter
Parameter
Conversion
12 Exploitation des résultats et conversions
12_Auswertg_f.fm Seite 132 Montag, 20. Februar 2006 13:26 Uhr