Hoefer PR625 Immunoblot - Manuel (Page 17)

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Note 5. Montage des joints toriques dans
les fentes
Si vos unités multiples à laver ne rentrent pas
dans les fentes facilement, appliquez une petite
quantité de graisse de silicone autour des joints
toriques. Placez l’appareil collecteur de manière
lâche dans le slot et pressez vers le bas sur le
côté du collecteur vers vous. Puis, appuyez sur
le côté opposé à vous pour le siège du collecteur
fermement dans la fente.
Note 6. Incubations d’anticorps secondaires
S’il vous plaît suivez les instructions fournies
avec votre système de détection Western blot.
Lorsque l’anticorps secondaire est utilisé dans
l’immunoblot à une dilution élevée (1:100,000
ou plus), une certaine diminution de l’intensité
du signal peut être observé. Cela peut être dû à
l’épuisement des anticorps dans le petit volume
du canal. Le problème peut généralement être
corrigée par:
1. Augmentation de la concentration d’anticorps
2-5 fois
2. Augmenter le volume d’anticorps, ou
3. Retirer la membrane de l’unité d’interpréta-
tion et l’incubation de l’anticorps secondaire
dans un bac.
Remarque: Soyez prudent
lorsque vous effectuez des incu-
bations plateau parce que les
anticorps monoclonaux de faible
affinité peuvent se dissocier de
leurs antigènes respectifs au fil
du temps. Incubation dans un
plateau de tels anticorps permet
de diffuser à travers la solution
d’incubation et relier ailleurs sur
la tache. Stries Telle est détect-
able comme une coloration
entre les voies d’échantillons
ou dans les couloirs de contrôle
négatif à la position d’un ou
de plusieurs bandes forte-
ment réactifs.