Hoefer SQ33 Sequencer - Manuel (Page 15)

3. SQ33 Mode d’emploi
3.1 Préparation Regent et volumes de gel
Polyacrylamide pour la reproductibilité et
uniforme de réticulation nous recommandons
désioniser, dégazage et filtration de gel
d’acrylamide des solutions avant de les utiliser.
Solutions d’acrylamide doit être stocké dans un
endroit frais et sombre comme un réfrigérateur
et un permis d’atteindre la température ambiante
avant de couler. Éviter l’exposition à la chaleur
et la lumière du soleil.
Des conditions de polymérisation doit être ajusté
pour effectuer la polymérisation en environ 5–10
minutes. Testez un petit volume dans une fiole
avant de couler le gel. A titre indicatif 100 ml de
gel d’acrylamide 6% dégazé mettra en environ
5 minutes à la température ambiante lorsque
mélangé doucement avec 450 μl de persulfate
d’ammonium fraîchement préparée de 10%
(p/v) et 200 μl de TEMED. Le temps de prise
augmente à environ 10 minutes si le volume
TEMED est réduite à 100 μl et à environ 15
minutes avec 75 μl. La quantité de catalyseurs
peut être nécessaire de réduire dans des
conditions chaudes. Ne pas verser directement
au soleil.
Le séquenceur SQ33, en utilisant 0,35 mm
d’épaisseur entretoises, nécessite environ 60 ml
de solution d’acrylamide.
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