Hoefer SE215 - Manuel (Page 9)

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Désaérer la solution de monomère et ajouter l’initia-
teur et un catalyseur juste avant la coulée du gel.
Remplir la solution dans un seul sandwich, permet-
tant la rainure dans le bouchon inférieur à distribuer
uniformément la solution entre les sandwichs. (Verser
dans plus d’un sandwich pourrait introduire des
poches d’air.) Regardez le niveau de solution à travers
la façade. Voir ci-dessous pour le niveau de la solution
appropriée en fonction de l’application.
Pas de gel d’empilement
Remplir avec une solution juste en dessous du haut
de la plaque à encoches. Si des poches d’air se
former, les retirer avec une pipette ou une seringue.
Mettre en place un peigne (avec un léger angle) dans
chaque sandwich, en prenant soin de ne pas empri-
sonner de l’air sous les dents.
Empilement de gel
Remplir avec une solution à 3 cm en dessous du haut
de la plaque de verre rectangulaire. Cette hauteur
permet 1 cm de gel d’empilement ci-dessous les
puits. Verser le gel et appliquer une superposition.
(Voir l’étape 3.) Après le gel est fixé, de préparer le
gel d’empilement comme décrit ci-dessous.
Électrophorèse 2-D
Remplir avec une solution à environ 1 cm en dessous
du haut de la plaque de verre rectangulaire. Cette
hauteur permet 4 à 5 mm d’espace pour la bande de
GPI et un joint d’agarose). Superposez le gel de sépa-
ration telle que décrite à l’étape 3.
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Si coulée gels de polyacrylamide, superposer chaque
gel avec une mince couche d’eau saturée du n-buta-
nol, de l’eau, ou un tampon de gel dilué pour empê-
cher l’exposition du gel à l’oxygène. Appliquer le
même montant à chaque gel de maintenir les niveaux
de gel de la même façon. Livrer la solution de super-
position lentement près de la cale sur le côté du
sandwich. Laisser la solution s’écouler à travers la
surface tout seul.
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Laisser le gel se polymériser pour un minimum de 1
heure. Voir page 12 pour pile démontage.
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Remarque: Éviter le contact
répété et prolongé de n-butanol
avec la chambre de coulée
acrylique pour empêcher
l’acrylique de devenir opaque.