Hoefer SE400 - Manuel (Page 20)

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Si peignes sont en place, passez à l’étape 4.
Si aucun des peignes sont en place, superposer le gel
de résolution d’une mince couche d’eau saturée du
n-butanol, de l’eau, ou un tampon de gel dilué pour
empêcher l’exposition de la surface supérieure de la
solution de gel à l’oxygène atmosphérique. Lentement
offrir la solution de superposition d’une seringue en
verre munie d’une aiguille de calibre 22. Appliquer la
solution à proximité de l’entretoise et lui permettre de
s’écouler à travers la surface nu.
4
Permettre au gel pour polymériser pour un minimum
d’une heure.
2.2.2 Empilement de gel
Verser le gel d’empilement avant de retirer le
sandwich de la roulette de gel. Empilement de
résolution de gel est optimale lorsque préparée
juste avant l’électrophorèse.
1
Retirez le cache en rinçant le haut du gel à plusieurs
reprises avec de l’eau distillée. Inversez le lanceur de
sorts à égoutter. Pour assurer un contact continu entre
la résolution et l’empilement des gels, enlever tout
liquide résiduel en tamponnant un coin avec un tissu
non pelucheux.
2
Calculer le volume de gel d’empilement monomère
solution.
3
Préparer la solution de gel d’empilement monomère, il
désaérer, et ajouter de catalyseur et initiateur. Verser
le gel d’empilement sur le gel de résolution avec une
pipette jetable ou Pasteur à un niveau d’environ 2 mm
à partir de la partie supérieure de la plaque de verre.
4
Mettre en place un peigne (avec un léger angle) dans
le sandwich, en prenant soin de ne pas emprisonner
de l’air sous les dents. Prévoir un minimum d’une
heure pour le gel à polymériser.