Hoefer SE900 - Manuel (Page 20)

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Démontage de la Caster Gel multiples
1 Placez le lanceur vers le bas sur le dos dans un bac ou un évier.
2 Retirer les pinces rouges et les vis de fixation de l'enjoliveur pour le
lanceur de sorts.
3 Faites glisser la façade.
4 Supprimer cassettes de gel et de feuilles de remplissage. Rincer à
l'extérieur des cassettes de gel pour enlever l'excès d'acrylamide
polymérisé.
5 Nettoyer les composants multiples roulettes gel avec un détergent de
laboratoire. Rincez et laissez sécher à l'air.
IPG équilibration bande
Avant bandes IPG sont placés sur le dessus du gel de seconde dimen-
sion, la mémoire tampon dans les bandes doit être remplacé par un
tampon approprié pour PAGE.
Equilibrer IPG bandes tampons dans équilibration appropriées.
Typiquement, un équilibrage en deux étapes (d'abord avec la
TNT et un second avec iodoacétamide) donne de meilleurs résultats
qu'une étape d'équilibrage TNT unique. La procédure suivante est
recommandée.
Procédure d'équilibrage
1 Décongeler deux aliquotes de la solution d'équilibrage.
2 Ajoutez 10 mg / ml TNT à une solution.
3 Place les bandes IPG dans le bac de réhydratation / équilibrage,
ou un tube de verre.
4 Ajouter 6,5 ml de solution à chaque emplacement contenant une
bande IPG.
5 Placez sur le culbuteur pendant 10-15 minutes.
Après équilibration, jeter la solution d'équilibrage d'abord dans une
manière appropriée.
6 Ajouter de 25 mg / ml iodoacétamide (AAI) à la seconde partie
aliquote de la solution d'équilibrage.
7 Ajouter 6,5 ml de solution à chaque emplacement contenant une
bande IPG.
8 Placez sur le culbuteur pendant 10-15 minutes.
Après équilibration, jeter la solution d'équilibrage deuxième d'une
manière appropriée.
Équilibrage suivant, les bandes IPG sont placés sur la surface du gel, la
deuxième dimension, et scellé en place avec la superposition d'agarose.
Remarque: le kit plaque, SE914, est
un accessoire pratique pour maintenir
temporairement les cassettes de gel lors du
démontage de la machine de coulée de gel
multiples.