BINDER CB 60 - Manuel (Page 101)

CB (E6) 09/2013 page 101/144
16. Mesures de référence
Des mesures de référence de la température, du CO
2
et d’O
2
(app. avec réglage d’O
2
) peuvent être exé-
cutées grâce à une ouverture de mesurage (N) en silicone au niveau de la porte intérieure. Des mesures
de référence de température sont toujours exécutées en état thermique stable, les portes de l’appareil
fermées.
16.1 Mesure de référence CO
2
Souvent, les clients souhaitent pouvoir effectuer des tests de mesure entre les réglages faisant partie des
opérations d'entretien annuel recommandées.
En principe, il y a trois possibilités de tester la concentration en CO
2
dans un incubateur. Elles sont dé-
crites dans les chapitres 18.1.1 à 18.1.3.
16.1.1 Mesure indirecte de la concentration de CO
2
par le pH du milieu
Il est possible de déterminer la concentration de CO
2
dans la chambre indirectement par la valeur pH du
milieu. C'est une méthode simple pour tester la concentration en CO
2
sans de l'équipement de mesure
spécifique. En effet, seul un indicateur pH ou une électrode de mesure pH est nécessaire, dont il s'agit
d'équipement standard des laboratoires de culture de cellules.
Cette méthode se base sur l'équilibre acide/base du système tampon dans le bouillon de culture. Les
bouillons de culture marchands sont tamponnés par NaHCO
3
. À l'aide de la valeur pH du milieu, on peut
donc déterminer la concentration en CO
2
. Figure 25 vous donne l'interrelation entre la concentration en
CO
2
en vol. % et le pH de différents milieux tamponnés NaHCO
3
.
Ce type de système ne doit pas être utilisé pour calibrer les capteurs BINDER.
Procédé recommandé :
•
Incubez un échantillon pour une demi-journée dans les mêmes conditions que celles de la culture des
cellules. Utilisez une bouteille à culture de cellule ou un flacon à couvercle ouvert de 50 ml.
• Après le gazage, retirez l'échantillon de l'incubateur et mesurez la valeur pH à l'aide d'une électrode
de gaz dans les 5 minutes qui suivent.
Pendant la mesure, veillez à ce que le milieu soit le moins possible en contact avec l'air ambiant, pour
une diffusion lente du gaz. Un mouvement significatif vers le bas ne pourra être observé qu’après les
5 minutes.
Il va sans dire qu'on peut utiliser les bandelettes de test pH (plage pH 6 à 8, sans purge).
4
6
8
10
12
14
16
18
2
3,70 g/l NaHCO
3
2,20 g/l NaHCO
3
0,85 g/l NaHCO
3
6.8 7.0 7.2 7.4 7.6
Valeur pH
Vol.% CO 2
0,35 g/l NaHCO
3
1,20 g/l NaHCO
3
Dénomination commerciale
des bouillons de culture:
DMEM
BME
MEM
Medium 199
Mc Coy
F10
F12
NaHCO
3
[g/l]
3,70
2,20
2,20
2,20
2,20
1,20
1,20
Figure 24: Valeur pH des
bouillons courants de culture,
tamponnés par NaHCO
3
en fonction de la concentra-
tion en CO
2
Exemple: Si un pH de 7,2 est mesuré dans un milieu tamponné à 2,20 g NaHCO
3
par litre, il doit y avoir
8 vol.-% CO
2
autour de ce milieu.