Leica Biosystems EG1160 - Manuel (Page 24)

24 Mode d'emploi V4.1 – 05/2001
1. Placer les cassettes contenant
les tissus déshydratés et infiltrés de
paraffine dans le bain à cassettes
(d’une capacité d’une centaine de
cassettes) qui est rempli de paraffine
liquide pour éviter une solidification
prématurée de l’échantillon.
Lorsque le bain est rempli de paraf-
fine liquide il conserve les cassettes
à une température optimale, homo-
gène.
Si le bain à cassette n’est pas entiè-
rement rempli de paraffine, ne pas
mettre des cassettes jusqu’au bord;
il risquerait en effet de se former sur
les cassettes de l’étage du haut une
pellicule de paraffine qui nuirait à la
qualité de l’enrobage.
Il existe une version du bain avec
infiltrateur sous vide. Pour réaliser
l’infiltration de paraffine sous vide il
suffit de raccorder la tubulure du
couvercle à une pompe à vide. Le
joint d’étanchéité du couvercle doit
être parfaitement propre pour que le
couvercle ferme bien et que le vide
puisse s’établir dans le bain. Il est
conseillé de maintenir le couvercle
appuyé lorsque la pompe se met en
marche, pour assurer une meilleure
étanchéité. Une fois l’infiltration ter-
minée on n’ouvrira le couvercle
qu’après avoir ouvert la vanne de
mise à l’air pour rétablir lentement
(!) la pression normale dans le bain.
2. Placer les moules dans le bac de
préchauffage.
N.B.: Attention de ne pas les expo-
ser à une température excessive
pour ne pas avoir de difficultés au
moment du démoulage.
N’utiliser que des moules parfaite-
ment propres et bien secs. Nettoyer
les moules d’abord au xylène, puis à
l’eau savonneuse; les rincer à l’eau
distillée et les sécher.
3. Sortir trois ou quatre cassettes
du bain; on peut procéder de deux
façons: soit en les posant sur la sur-
face de travail pour les égoutter et
décapsuler aussitôt, soit en les met-
tant en attente dans la cuvette rem-
plie de paraffine liquide pour éviter
une solidification prématurée du
tissu infiltré. Ceci est surtout impor-
tant pour les petites biopsies. Si la
cuvette n’est pas rempli de paraffine
elle constitue simplement un prolon-
gement de la surface de travail.
4. Choisir un moule de taille appro-
priée, le placer sous la vanne du dis-
tributeur et le remplir de paraffine
jusqu’à la hauteur voulue:
a) en appuyant sur la pédale;
b) en exerçant une légère pression
du doigt sur le levier;
c) si on utilise des moules de grande
dimension on peut rabattre le le-
vier vers l’arrière pour ne pas être
gêné. On peut alors choisir le dé-
bit de paraffine approprié à l’aide
du réglage par pas de 10%.
5. Ouvrir la cassette, prélever
l’échantillon à l’aide de la pincette
préchauffée et le placer dans le
moule.
Le bac à paraffine devra être rempli
de pastilles de paraffine (p.ex.
HISTOWAX Leica) jusqu’à 2-3 cm du
bord.
Lorsque l’écran affiche “Bac de pa-
raffine sur réserve” on dispose en-
core d’une réserve d’un litre environ.
Il est alors temps de rajouter de la
paraffine.
Lors de la présélection de la tempé-
rature pour le bac à paraffine on
choisira une valeur entre le point de
fusion et la valeur maximale indiquée
par le fabricant de la paraffine qu’on
utilise.
Dès que tous les éléments fonction-
nels ont atteint les températures de-
mandées et que la paraffine est en-
tièrement fondue dans le bac on peut
procéder à l’inclusion.
N.B.: On fera très attention à ce que
la paraffine ne dépasse pas la tem-
pérature voulue pour ne pas risquer
d’abîmer l’échantillon.
11. Inclusion