Hoefer HE99X - Manuel (Page 23)

tournant sur la surface transilluminateur ou
faites glisser le gel sur la surface pour une expo-
sition maximale. (Le plateau en cours d’exécu-
tion est de 95% transparent à la lumière 302-nm
et transparente à 40% à 254 nm la lumière.)
Voir l’échantillon sous une lumière UV 366-nm
ou réduit l’intensité de la lumière UV 302-nm
pour réduire photonicking.
Afin de réduire la fluorescence de fond de
bromure d’éthidium non lié, le gel peut être
décoloré par trempage pendant 5 minutes dans
0,01 m MgCl
2
, ou pour 1 heure de 0,001 M
MgSO
4
. Décoloration rend plus faciles à détecter
de petites quantités (moins de 10 ng) d’ADN.
(Sambrook, section 6.15).
Transférer
Avant le transfert, couper les crêtes aux deux
extrémités du gel pour assurer un contact, même
gel avec la membrane.
Bibliographie
Ausubel, et al., (eds). Current Protocols in
Molecular Biology. Greene Publishing and
Wiley-Interscience. New York (1993).
Sambrook, J., and Russell, D.W., Molecular
Cloning: A Laboratory Manual. Cold Spring
Harbor Laboratory Press. (2001).
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p15